东帝汶养殖场非洲猪瘟科研成果分享

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 五级生物安全是指由外到内的分区管理，污区、缓冲区、生活区、生产区、猪舍。跨区需要消毒、换鞋衣、洗手。东帝汶养殖场非洲猪瘟科研成果分享

非洲猪瘟的流行病学很复杂，迄今为止描述了四种流行传播循环。虽然这四种流行循环是单独的，但由于人类活动，可能发生循环间病毒溢出和传播。特别是，人类在非洲猪瘟病毒的长距离转运中扮演重要角色，从而有助于扩大其地理范围。在东部和南部非洲，非洲猪瘟病毒通过古老的森林循环持续存在，涉及自然生物媒介（即钝缘蜱属（Ornithodoros）软蜱）和自然哺乳动物宿主（即普通疣猪）。这种循环确保了病毒在局部环境中的持续存在。在非洲部分和伊比利亚半岛的家猪-蜱循环中，莫氏钝缘蜱复合体（O.moubatacomplex）和不规则钝缘蜱（O.erraticus）分别作为生物媒介和局部病毒储存库。在当今存在非洲猪瘟的世界大部分地区，家猪循环占主导地位。在此循环中，病毒通过动物间接触、摄入受阳性的猪肉或其他受污染材料，或通过与污染物（如衣物、运输车辆或饲料供应）间接接触在家猪间传播。因此，人类活动在此传播循环中起关键作用，流行病学模式与当地/区域猪价值链的特性密切相关，这些特性可能因区域内外而异。除上述之外，还描述了第四种循环，称为野猪-栖息地循环。这种循环在欧洲大部分地区观察到，涉及野猪作为宿主，野猪尸体和局部环境在病毒持续存在中起关键作用。文莱沙尘天气非洲猪瘟应急处理流程八方同创总结：病毒可在钝缘软蜱体内存活并复制。

    从1G到6G——“拔牙”技术的持续进化猪场一旦发现非洲猪瘟，减少损失的措施就是通过临床观察和诊断确诊进行“选择性淘汰——我们通常称之为拔牙”。自2019年起，八方同创便专注于阳性猪“拔牙”，根据非洲猪瘟病毒不同的流行特点，自创从初代（1G）依靠临床观察非洲猪瘟典型症状淘汰阳性猪，到第二代技术(2G)结合临床症状和口鼻拭子的PCR检测进行淘汰阳性猪，到第三代（3G）技术体系，就是在2G基础上增加尾根血拭子，淘汰阳性猪；第四代技术（4G）增加抗体检测；随着非洲猪瘟病毒的毒力弱化，第五代（5G）技术体系，增加了主动应急技术和两次抗体检测，确保耐过猪被淘汰；第六代（6G）技术增加非洲猪瘟病毒的鉴别诊断技术，根据病毒传播特点、毒力强弱、抗体消长规律确定拔牙方案。八方同创的拔牙技术体系是根据非洲猪瘟病毒临床症状、流行特点、传播路径、病毒血症和抗体消长规律进行研发与迭代。该技术体系从依靠临床症状的1G阶段，逐步发展到融合现场快速检测与多重PCR测序的6G技术。每一次升级都针对病毒变异与防控难点，实现了更快速的检测、更早期的识别和更准确的淘汰，帮助猪场减少损失，体现了公司与时俱进的技术创新能力。

非洲猪瘟病毒主要靶向巨噬细胞，并引起严重的免疫病理性细胞因子风暴，这与出血相关并导致严重的免疫失败后果。诱导这种先天免疫反应的机制尚不清楚，考虑到病毒有效关闭巨噬细胞细胞因子和干扰素反应的能力，这一点令人困惑。虽然其中一些反应是致病性的，但基本知识是早期先天免疫反应对于触发适应性免疫是必需的。例如，在免疫反应的先天阶段检测到早期干扰素α（IFN-α）和白细胞介素1受体拮抗剂（IL-1RA）与改善的结局相关。

总体而言，我们对先天免疫反应的诱导以及导致致命疾病或保护性免疫反应的转换机制的理解存在差距。从非洲猪瘟康复的动物完全排清病毒，并发展出对相似毒株甚至某些情况下对异源病毒攻毒的保护(Boinas,Hutchings,etal.2004;Burmakinaetal.2016;K.Kingetal.2011）。虽然这清楚地证明了适应性免疫的发展，但关于保护相关物和保护机制的信息非常不完整(Bosch-Camós,Lopez,andRodriguez2020;Carlson,O’Donnell,etal.2016)。文献中描述了大量病毒蛋白以及许多抗体和T细胞的病毒靶标，但尚未鉴定出完全保护的B细胞抗原或表位，已测试的T细胞表位在一些研究中介导部分保护。 八方同创总结：很多常用消毒剂对非洲猪瘟病毒有效，如3%烧碱戊二醛、过硫酸氢钾、二氯异氰尿酸钠等有效。

非洲猪瘟病毒的初级复制发生在离病毒进入点相近的淋巴结的单核细胞和巨噬细胞中。因此，在经口或口鼻暴露的情况下，扁桃体和下颌淋巴结的单核细胞和巨噬细胞首先受累。随后，病毒通过血液和/或淋巴系统传播到次级复制位点，如淋巴结、骨髓、脾脏、肺、肝和肾。大多数非洲猪瘟病毒分离株与红细胞膜结合，并在阳性猪中引起红细胞吸附。然而，一些分离株不诱导红细胞吸附。虽然非洲猪瘟病毒主要在髓单核细胞中复制，但它也在内皮细胞、肝细胞、肾小管上皮细胞和中性粒细胞中复制。普遍认为，髓单核细胞的损坏是非洲猪瘟发病机制的关键因素。此外，非洲猪瘟病毒通过调节宿主细胞因子引起免疫抑制，导致过度的组织炎症和细胞凋亡。此外，髓样细胞的破坏导致细胞成分（即危险信号）的释放。当单核细胞/巨噬细胞被侵害时，它们分泌多种介质，包括促炎细胞因子，如白细胞介素-1、IL-6和肿瘤坏死因子α（TNF-α）。这些细胞因子能够触发急性期反应、炎症、内皮细胞受损和细胞凋亡。TNF-α起关键作用，因为它能够诱导血管舒张和通透性增加并调节血管内皮细胞的受损状态（促凝/抗凝）。此外，TNF-α参与细胞凋亡的调节。八方同创要求非洲猪瘟阳性场，做好内防扩散措施，种猪免疫“一猪一针头”，仔猪“一窝一针头”。缅甸哺乳母猪非洲猪瘟发病症状表现

非洲猪瘟病毒可以通过污染物资、人员、车辆、饲料、水源、苍蝇蚊子老鼠等，甚至空气中的尘埃传入猪场。东帝汶养殖场非洲猪瘟科研成果分享

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟弱毒株阳性场的其它管理细节如下：1、禁止料槽清余料，阳性猪淘汰赶离后，禁止料槽清料，但每次消毒都要不进栏消毒清空的栏舍，包含料槽、栏杆。2、停止清粪、严禁用高压水枪冲洗猪圈，阳性栏舍的猪清理后，用3%烧碱消毒（原位消毒），然后退出后不得再进入。同单元其它栏舍也禁止人员进入，停止所有栏舍清粪，严禁用高压水枪冲洗猪圈。只能在走道采用雾化带猪消毒及对空栏消毒。3、密封清空的猪圈风机口等，防止病毒的扩散，为保护全场其它栋舍猪只安全，清空的猪栏风机口、门窗、水帘、密封，暂不做清洗，禁止人员进入，阳性猪舍的工具不得外移。东帝汶养殖场非洲猪瘟科研成果分享

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