外泌体(exosome)是一种由活细胞分泌的,直径约为40~160nm的具有双层膜结构的生物活性囊泡。它携带了分泌细胞包含的生物活性物质,如DNA、miRNAs、mRNA、长链非编码RNA(LncRNA)、酶、蛋白质和细胞代谢物等。外泌体在细胞间通信中扮演着十分重要的角色。目前对于外泌体的研究涉及包括瘤的发生和发展、侵袭转移机制、瘤诊断标志物以及药物传递系统等诸多方面。外泌体是一个高度异质性的群体,具有独特的诱导复杂生物学反应的能力。外泌体的异质性可以根据其大小、含量(载物)、对受体细胞的功能影响以及细胞来源来区分。这些特征的不同组合导致了外泌体的复杂异质性。症状细胞来源的外泌体含有与症状进展相关的分子。细菌外泌体提取试剂盒生产厂家

研究者利用电穿孔法对外泌体进行DOX的负载,进行体内抗中流效果的研究。实验结果显示,负载DOX的iRGD肽靶向性外泌体对中流的抑制效果远优于单纯的DOX。直接静脉注射DOX,其不仅水溶性低,而且容易使DOX与血液中的蛋白结合,从而被网状内皮系统识别捕获,起不到理想的抗中流效果。而用iRGD肽靶向性的外泌体保护DOX,可以提高DOX水溶性,避免被网状内皮系统捕捉,提高靶向性,从而降低由于用药过量和非靶向性引起的毒性,起到更好的抗中流效果。杭州血液外泌体外泌体属于胞外囊泡类,除了外泌体之外细胞还分泌微泡以及其它的膜囊泡。

血清中的miR-122和miR-145非常不稳定,将血清在4°C短期保存期间即发生降解,这可能是由外泌体的异质性所导致的。–80°C保存被公认是保存各种生物标本如尿、牛奶、血液和支气管肺泡灌洗液适宜的保存环境,虽然这样保存血浆可能产生含有大量“污染物”的外泌体。4°C保存虽然容易导致外泌体中蛋白和核酸的损失,但却能够避免冻融过程造成的囊泡破坏。外泌体虽然建议保存于-80°C环境下,但在处理或运输过程中有时很难维持这种低温条件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一种冻干法以保存外泌体,在冷冻过程中使用海藻糖作为保护剂,海藻糖可以提供生物保护作用,如稳定蛋白质、细胞膜和脂质体;减少冷冻过程中冰的形成;防止蛋白质以及外泌体的聚集;减少分离和保存过程中细胞外囊泡的损失等。
外泌体的提取方法:超速离心法,这是外泌体提取比较常用的方法。超速离心法得到的外泌的体量比较多,但是纯度不足,电镜鉴定时发现外泌体聚集成块,由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准,也有一些研究认为此种方法得到的是微泡而不是外泌体。过滤离心法,这种操作简单、省时,不会影响外泌体的生物活性,但同样存在纯度不足的问题。密度梯度离心法,用此种方法分离到的外泌体纯度高,但是前期的准备工作繁杂,比较耗时,量少。外泌体存在于组织样本中,如脑组织、肌肉组织、脂肪组织等。

在Rameshwar等的研究中,采用转染间充质干细胞的方法,使外泌体载有anti-miR-9。在进行间充质细胞和多形性成角质细胞瘤(GBM)细胞间anti-miR-9传递的实验时,发现两种细胞不仅可以通过缝隙连接介导的细胞间通讯(GJIC)也可以通过外泌体传递anti-miR-9。且anti-miR-9降低两种GBM细胞(U87和T98G)对中流药物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌体传递的anti-miR-9实现,而非经GJIC传递的anti-miR-9,显示出外泌体在运载miRNA进行基因zhiliao时的潜力。利用外泌体进行GBM的zhiliao不只停留在体外细胞实验上,也已经有相关的体内zhiliao报道。外泌体内主要含有核酸、蛋白质和脂质等,可作为疾病诊断标记物、调控靶细胞功能、参与细胞生物学活动等。外泌体吞噬实验
外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm)。细菌外泌体提取试剂盒生产厂家
胃病作为一种常见的恶性瘤,在亚洲具有较高的发病率.胃病的临床诊断方法与结肠病相同,主要依靠内窥镜,早期胃病的症状并不明显,且临床常用的瘤标志物对胃病患者特异性与敏感性均较差,因此,胃病往往发现于晚期,并伴有不同程度的转移。研究者发现胃病细胞高表达CD97并可经外泌体分泌的方式调节瘤细胞的MAPK信号通路,促进瘤细胞的增殖与侵袭。外泌体中CD97的检测成或许能成为一种有潜在价值的胃病诊疗工具。胃病细胞能选择性地将let-7包装到外泌体中,并释放至周围环境中,促进胃病的恶性进展。胃病细胞外泌体可作用于抗瘤的T细胞,抑制AKT的活性。外泌体与免疫细胞之间的相互作用揭示了瘤抑制免疫功能的潜在机制。在另一项被认为有潜在胃病诊断价值的lnRNA的研究中,通过对胃病患者、胃上皮异型增生与健康人的比较发现,LINC00152在胃病患者的血液中可被检测到高表达,且手术前后有明显变化。血清LINC00152主要存在于外泌体中,在外泌体的保护下,可以稳定保存,血清外泌体LINC00152具有胃病标志物的潜能。细菌外泌体提取试剂盒生产厂家
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