二代测序的优势和劣势有哪些?优势:能够同时得到大量的序列数据,相比于一代测序技术,通量提高了成千上万倍;单条序列成本非常低廉。劣势:序列读长较短,Illumina平台为250-300bp,454平台也只有500bp左右;由于建库中利用了PCR富集序列,因此有一些含量较少的序列可能无法被大量扩增,造成一些信息的丢失,且PCR过程中有一定概率会引入错配碱基。想要得到准确和长度较长的拼接结果,需要测序的覆盖率较高导致结果错误较多和成本增加。二代测序实验与测序原理是什么?福建嘉安健达二代测序检测
常见的二代测序平台有哪些?
一、Illumina系列
NovaSeq系列:通量高,可产出大量测序数据,适用于大规模基因组测序、转录组测序等项目,能满足科研和临床对高通量数据的需求,如NovaSeq6000,其S2试剂可实现PE50/PE100/PE150测序,产出1.2T/flowcell.
HiSeq系列:包括HiSeqXten、HiSeq等型号,不同型号在通量、读长和应用场景上有所差异,如HiSeqXten的PE150测序可达到120G/lane,常用于人类基因组重测序等项目.
MiSeqDesktopSystem:是桌面型测序系统,通量相对较低,但操作简便、快速,适合小型实验室或特定的小规模测序项目,如针对特定基因的测序研究. 静安区哪里有二代测序检测二代测序常用于产前的检测或诊断。
二代测序技术的一些研究进展②植物基因组学研究领域:花生四倍体野生种基因组测序:河南农业大学殷冬梅教授团队和上海交通大学韦朝春教授团队联合发布了花生四倍体野生种近乎完整基因组amon2.0版本。该研究结合ONT超长读段、二代测序和Hi-C等多种测序技术,使基因组的连续性、完整性和准确性都得到了显著提高,为花生的遗传驯化和分子育种提供了重要的基因组数据信息资源。长雄野生稻基因组解析:中科院昆明动物所王文研究组与云南省农科院粮食作物研究所胡凤益研究组等中外机构合作,利用二代测序技术成功组装出高质量的长雄野生稻基因组,并对其与近缘物种的分歧时间、基因的收缩扩张等进行了分析,还鉴定出一批可能影响地下茎以及自交不亲和性状的候选基因及代谢途径,为解析相关分子机制提供了重要线索。
不同二代测序技术平台的速度Illumina测序平台:这是目前市场上应用较为***的二代测序平台之一,其测序速度较快。例如IlluminaNovaSeq系列,一次运行可以在1-3天内产生大量的数据,通量可达数亿甚至数十亿条读长,能够满足大规模基因组学研究和临床检测的需求。Roche454测序平台:Roche454测序系统的测序速度也较快,其特点是测序片段比较长,高质量的读长能达到400bp左右,一次运行可以在24小时左右完成对一定数量样本的测序。BGISEQ系列:华大智造的BGISEQ系列测序仪在速度上也有出色表现,如全球二代测序速度**快设备E25量产,为快速测序提供了有力支持二代测序技术不断发展,其不断提高的速度、准确性和成本效益为各个领域开辟了新的可能性。
常见的二代测序类型①
全基因组测序(WGS):对生物体整个基因组进行测序,涵盖所有基因、非编码区域、调控区域等。能***检测基因组变异,但数据量和成本较高,适用于复杂疾病研究、物种进化分析等.
全外显子组测序(WES):针对基因组中全部外显子区域测序,可快速鉴定基因突变,性价比高,常用于遗传病诊断、**基因突变检测等,助力发现致病基因和潜在***靶点.
转录组测序(RNA-Seq):对特定细胞或组织在特定状态下的 RNA 转录情况测序,包括 mRNA、lncRNA、miRNA 等,可检测基因表达水平、剪接变异、可变剪接等信息,用于基因表达调控研究、疾病标志物筛选、药物研发等. 在基因组研究方面,二代测序能够分析生物体的整个基因组,促进遗传变异、基因表达和基因组结构的研究。南京二代测序价格
二代测序是先打断DNA,使其片段化。福建嘉安健达二代测序检测
二代测序在代谢组研究中的应用途径①
通过转录组测序关联代谢组
原理:转录组测序借助二代测序技术可以获取细胞或组织中所有mRNA的表达信息。由于基因表达**终会影响代谢过程,mRNA转录水平的变化往往会导致后续代谢途径中关键酶的表达改变,进而影响代谢物的合成与转化。例如,当某个参与糖代谢途径的关键酶基因转录上调时,对应的酶含量可能增加,从而加速该代谢途径的运转,使代谢产物的量也随之发生变化。
案例:在植物抗逆研究中,对遭受干旱胁迫的植物和正常生长的植物分别进行转录组测序。发现许多与渗透调节物质(如脯氨酸、甜菜碱等)合成相关的基因转录水平在干旱胁迫植株中显著提高。再结合对植物代谢组的分析,的确检测到脯氨酸、甜菜碱等代谢物的含量明显增多,表明植物通过调节基因转录来改变代谢,以适应干旱环境。
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