湖南药物开发使用糖尿病细胞模型

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糖尿病细胞模型基本参数

品牌
Human Cell Design
产品名称
人源胰岛B细胞

糖尿病细胞模型企业商机

Humancelldesign开发了创新且安全的人类β细胞系生产方法。首先，将每个转导的人类胎儿胰腺芽移植到2或3只SCID小鼠的肾被膜下，因为该部位是人类胰腺发育的允许部位。在6到8个月内，所有移植的小鼠都发生了原发性胰岛素瘤，这导致它们的血糖水平下降。与其他胰腺移植相比，原发性胰岛素瘤是高度血管化的。然后将原发性胰岛素瘤中这些高度血管化的区域分离，用在大鼠胰岛素启动子控制下表达hTERT的慢病毒进行转导，并移植到其他SCID小鼠中。这些小鼠在2至3个月内出现低血糖，胰岛素阳性细胞大量扩增。这种体内扩增有助于维持大量增殖的胰岛素细胞，并允许定义允许的培养条件，在这种条件下，可以在体外建立永生化细胞系。糖尿病细胞模型EndoC-BH1细胞检测到B细胞转录因子PDX1, MAFA, NKX6-1和NEUROD1表达与人胰岛细胞制备相似。湖南药物开发使用糖尿病细胞模型

人源胰岛B细胞模型对于与胰岛相关的代谢疾病研究，包括尿病，糖尿病炎症，针对GLP-1R的Exendin4等类似药物开发有重要作用。通过干细胞诱导B细胞产生的胰岛B细胞存在纯度较低，缺乏成熟胰岛B细胞功能等问题。道过捐赠组织的胰腺B细胞提取，存在供应量较低，明显批次效应，耗时较长等问题。使用糖尿病动物模型进行研究会比糖尿病细胞模型成本更高昂，周期更长。Human cell design 构建了EndoC-BH1,En-doC-BH3,EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2〖ndoC-βH5等一系列的胰岛R细胞模型。通过多轮次优化改良，获得的功能胰牌B细胞，无限接近天然人源胰岛B细胞，其胰岛素分泌功能与天然细胞类似，基于PDX1/KX6.1关键基因验证的细胞均一性达到90%以上(左图)，在2.8nand11 my葡萄糖剂量下表现出10倍的胰岛素分泌反应(右图)，对GLP-1R激动剂，Exendin4刺激产生明细那反馈，且可实现批量化生成，实现稳定供应。天津EndoC-BH3糖尿病细胞模型胰岛B细胞冻存复苏步骤。

EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等细胞可在体外在葡萄糖剂量刺激下产生正常的胰岛素分泌反应，对GLP-1R/GLP-1等胰岛素刺激因子产生正常响应，可以响应细胞因子刺激，表达HLA-A2等T细胞受体，因此可用于糖尿病炎症相关等多种药物开发实验。EndoC-BH5细胞可批量稳定生产，因此可以进行基于siRNA的高通量筛选研究中，用于鉴定出潜在的2型糖尿病药物靶点。另外，Humancelldesign根据法国生物伦理立法收集人类胎儿组织，获得法国生物医学局（巴黎）的批准，批准号为PFS08-005。

根据啮齿动物β细胞获得的数据，葡萄糖转运蛋白SLC2A2头次被认为是葡萄糖传感器蛋白。SLC2A2在人胰岛细胞中的表达水平极低，表明葡萄糖在大鼠β细胞中通过SLC2A2转运，而在人β细胞中主要通过SLC2A1和/或SLC2A3转运。研究表明SLC2A2mRNA在EndoC-βH1细胞中表达，因此，EndoC-βH1细胞应该是一个有用的模型，用于解剖不同葡萄糖转运体在人β细胞中的特定作用。Human cell design 构建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰岛B细胞模型。胰腺B细胞是高度特化的内分泌细胞，产生、储存和分泌胰岛素.

Humancelldesign构建了EndoC-BH1,En-doC-BH3,EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰岛B细胞模型。通过多轮次优化改良，获得的功能胰腺B细胞，无限接近天然人源胰岛B细胞，其胰岛素分泌功能与天然细胞类似，基于PDX1/NKX6.1关键基因验证的细胞均一性达到90%以上，在2.8mMand11mM葡萄糖剂量下表现出10倍的胰岛素分泌反应，对GLP-1R激动剂，Exendin4刺激产生明显增强，且可实现批量化生成，实现稳定供应。此外Humancelldesign开发系列人源胰岛B细胞模型EndoC-BH5的同时，开发了配套的细胞培养试剂，可用于细胞培养和后续相关实验。糖尿病细胞模型—EndoC-BH5 细胞是 EndoC-BH 细胞家族中的较新细胞。云南糖尿病细胞模型RNA测序验证胰岛细胞基因表达

糖尿病细胞模型接近原代成人 B 细胞，是更好地了解人类 B 细胞生理学和开发糖尿病新疗法的重要模型。湖南药物开发使用糖尿病细胞模型

EndoC-βH5细胞是一种新型人类胰腺β细胞解决方案，可用于开发人类糖尿病模型以及药物筛选和验证平台，产生流程为：DNA构建，慢病毒载体产生，人胎儿胰腺外植体与pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒载体共转导，移植到SCID小鼠的肾囊下，导致八个月后形成胰岛素瘤，从而获得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5细胞分别在Opti-β1和Ulti-b1培养基中的βCoat涂层塑料板上培养。使用胰蛋白酶（0.05%）每7天繁殖一次细胞。流式细胞术分析表明所有EndoC-βH5细胞均呈胰岛素阳性，并且在绝大多数细胞中检测到PDX1和NK6.1表达（分别为92.3%和90%）。EndoC-βH5细胞在涂层塑料上形成小的贴壁簇.湖南药物开发使用糖尿病细胞模型

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