企业商机
免疫沉淀基本参数
  • 品牌
  • 世途科生物
  • 产品名称
  • 免疫沉淀磁珠Protein A/G
  • 有效期
  • 12个月
免疫沉淀企业商机

当细胞被裂解后,这些蛋白质复合物在一定条件下仍能保持相对稳定。我们向裂解液中加入针对某个已知蛋白(通常称为诱饵蛋白)的特异性抗体,抗体与诱饵蛋白特异性结合形成抗原 - 抗体复合物。借助 Protein A/G 磁珠或琼脂糖珠这类固相载体,其表面的 Protein A 或 Protein G 能够与抗体的 Fc 段紧密相连,通过离心或磁力分离,将抗原 - 抗体复合物连同与之相互作用的其他蛋白质(猎物蛋白)一同从裂解液中沉淀出来,从而实现对蛋白质复合物的富集和分析,揭示蛋白质之间的相互作用关系。免疫沉淀通过孵育、沉淀、清洗等步骤,从细胞裂解液中富集特定蛋白用于后续分析。杭州anti Flag免疫沉淀外包公司

免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是一种基于抗原-抗体特异性结合原理的实验技术,广泛应用于分子生物学和生物化学研究中,用于从复杂混合物中分离和富集特定的目标蛋白或多肽。该技术利用抗体与目标蛋白之间的高亲和力和特异性结合,形成抗原-抗体复合物,再通过固相载体(如琼脂糖珠或磁珠)将复合物从溶液中分离出来。免疫沉淀技术不仅可用于蛋白质的纯化和鉴定,还可用于研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质翻译后修饰以及蛋白质功能分析等领域。杭州Co IP免疫沉淀选磁珠还是琼脂糖珠通过免疫共沉淀(Co-IP),可以研究蛋白质之间的相互作用网络。

免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是一种广泛应用于分子生物学和生物化学实验中的技术,主要用于从复杂混合物中分离和富集特定的目标蛋白或多肽。该技术基于抗原与抗体之间的特异性结合,通过抗体与目标蛋白的结合,再利用固相载体(如琼脂糖珠或磁珠)将抗原-抗体复合物从溶液中分离出来。免疫沉淀技术不仅可用于蛋白质的纯化,还可用于研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质翻译后修饰以及蛋白质功能分析等领域。免疫沉淀的基本步骤包括样品制备、抗体孵育、复合物捕获和洗脱。

Co-IP技术具有许多优势,如操作简便、灵敏度高、能够反映细胞内蛋白质相互作用的真实情况等。然而,该技术也存在一些局限性。例如,Co-IP的结果可能受到抗体特异性、细胞裂解条件、沉淀效率等多种因素的影响,导致假阳性或假阴性结果的出现。此外,Co-IP技术无法提供蛋白质相互作用的空间和时间信息,需要结合其他技术如共聚焦显微镜等进行综合分析。为了克服Co-IP技术的局限性,科学家们通常将其与质谱技术相结合进行深入研究。通过质谱技术对Co-IP沉淀下来的蛋白质复合物进行鉴定和定量分析,可以进一步揭示蛋白质相互作用的细节和机制。这种结合应用不仅提高了Co-IP技术的准确性和可靠性,还为蛋白质相互作用网络的研究提供了更加的视角。免疫沉淀借抗体与抗原特异性结合,从样本里分离目标分子,助力科研探索生物分子奥秘。

随后,引入一种固相载体,如蛋白 A 或蛋白 G 偶联的琼脂糖珠。这些固相载体能够与抗体的 Fc 段结合,从而将抗原 - 抗体复合物从溶液中沉淀下来。经过多次洗涤步骤,去除未结合的杂质,通过适当的方法,如加热或添加洗脱缓冲液,将目标分子从复合物中释放出来,以便后续的分析检测。免疫沉淀技术在多个领域有着广泛的应用。在基础科研中,它常被用于研究蛋白质 - 蛋白质相互作用,通过捕获与目标蛋白相互结合的其他蛋白,绘制蛋白质相互作用网络,有助于揭示细胞内复杂的生物学过程。利用 Protein A/G 免疫沉淀,可深入探究蛋白质在细胞内的功能与相互作用。杭州anti Flag免疫沉淀外包公司

anti DYKDDDDK 免疫沉淀实验,操作要点在于抗体与样本的恰当处理及孵育条件。杭州anti Flag免疫沉淀外包公司

免疫沉淀技术的发展经历了多个重要阶段。初,免疫沉淀技术是作为亲和柱色谱的一种改进方法而被开发出来的,当时在微量离心管中使用少量的琼脂糖树脂来完成相关操作。随着科研需求的不断增加和技术的逐步进步,磁性微粒(磁珠)开始逐渐取代琼脂糖,成为免疫沉淀的优先支持物。磁珠具有更高的扩散速率,使得孵育时间缩短,同时在纯度和可重复性方面也有了提升。自 20 世纪 70 年代单克隆抗体技术取得重大发展后,免疫沉淀技术迎来了新的飞跃。单克隆抗体的出现提升了抗原 - 抗体结合的特异性和灵敏度,使得免疫沉淀在蛋白质相互作用等研究领域能够发挥更为重要的作用。之后,根据不同的检测目的,免疫沉淀技术又进一步衍生出了免疫共沉淀(Co - IP)、染色质免疫共沉淀(ChIP)和 RNA 免疫共沉淀(RIP)等多种新型技术,这些衍生技术不断拓展着免疫沉淀技术在生物医学研究中的应用范围,从单纯的蛋白质分离鉴定,逐渐深入到蛋白质与蛋白质、蛋白质与 DNA、蛋白质与 RNA 等多种生物分子相互作用的研究领域,为生命科学研究提供了更为强大的工具。杭州anti Flag免疫沉淀外包公司

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