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免疫沉淀基本参数
  • 品牌
  • 世途科生物
  • 产品名称
  • 免疫沉淀磁珠Protein A/G
  • 有效期
  • 12个月
免疫沉淀企业商机

孵育结束后,加入 Protein A/G 珠子,再次孵育,使抗原 - 抗体复合物与珠子紧密结合。随后通过离心或磁力分离,将结合有复合物的珠子收集起来,接着用洗涤液多次洗涤,去除未结合的杂质,确保沉淀的纯度。,利用洗脱液将目标蛋白从珠子上洗脱下来,得到纯化的目标蛋白,用于后续的分析检测,如蛋白质印迹(Western Blot)、质谱分析(Mass Spectrometry)等。IP 免疫沉淀技术具有诸多优势。一方面,它能够从复杂的生物样品中高效富集低丰度的目标蛋白,极大地提高了检测的灵敏度,使研究人员能够对微量表达的蛋白质进行深入研究。科研人员常用免疫沉淀,研究疾病相关蛋白在病理过程中的作用及分子机制。苏州Co IP免疫沉淀磁珠价格

免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是一种广泛应用于分子生物学和生物化学实验中的技术,主要用于从复杂混合物中分离和富集特定的目标蛋白或多肽。该技术基于抗原与抗体之间的特异性结合,通过抗体与目标蛋白的结合,再利用固相载体(如琼脂糖珠或磁珠)将抗原-抗体复合物从溶液中分离出来。免疫沉淀技术不仅可用于蛋白质的纯化,还可用于研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质翻译后修饰以及蛋白质功能分析等领域。免疫沉淀的基本步骤包括样品制备、抗体孵育、复合物捕获和洗脱。深圳Protein AG免疫沉淀磁珠多少钱该技术广泛应用于蛋白质组学研究,帮助科学家揭示蛋白质功能与相互作用。

免疫沉淀的操作流程较为复杂且精细,大致可分为以下几个关键步骤。首先是细胞裂解,收获细胞后,加入适量含有蛋白酶抑制剂的细胞 IP 裂解缓冲液,在冰上或者 4℃环境中裂解 30 分钟左右,之后以 12,000g 的离心力离心 30 分钟,取上清液,这一步是为了释放细胞内的蛋白质并防止其被降解。接着,取少量裂解液留存用于后续 western blot 分析对比,剩余裂解液中加入 1μg 相应的抗体以及 10 - 50μl 的蛋白 A/G - beads,在 4°C 条件下缓慢摇晃孵育过夜,促使抗原抗体充分结合以及复合物与珠子结合。然后进行免疫沉淀反应,反应结束后在 4°C 以 3,000g 速度离心 5 分钟,将蛋白 A/G - beads 离心至管底,小心吸去上清,并用 1ml 裂解缓冲液洗涤珠子 3 - 4 次,去除杂质。加入 15μl 的 2×SDS 加样缓冲液,沸水煮 10 分钟,使抗原与抗体解离,离心收集上清,此时上清中就包含了我们所需要的目标蛋白,可用于后续的 SDS - PAGE、western blotting 或质谱分析等。例如在研究某一细胞内信号通路关键蛋白时,严格按照这样的操作流程,能够成功获取目标蛋白用于深入研究其在通路中的作用机制。

随着生物技术的不断进步和创新,Co-IP技术将在生命科学领域发挥越来越重要的作用。未来,我们可以期待更加高效、灵敏和特异性的Co-IP技术的出现,以及与其他先进技术的更加紧密的结合应用。这将为揭示生命活动的奥秘、推动医学和生物科学的发展提供更加有力的支持和保障。同时,我们也需要注意到Co-IP技术存在的局限性和挑战,不断探索和完善相关技术和方法以应对这些挑战。Co-IP(免疫共沉淀)是一种基于抗原-抗体特异性结合原理的蛋白质相互作用研究方法。该技术通过特定的抗体与目标蛋白质结合,形成抗原-抗体复合物,进而利用这种复合物的物理特性,如大小、密度等,在细胞裂解液中将与目标蛋白质相互作用的蛋白质一同沉淀下来。这种方法不仅能够揭示蛋白质间的直接相互作用,还能在一定程度上反映这些相互作用在细胞内的真实状态。Co-IP技术的成功应用,为蛋白质组学和系统生物学研究提供了强有力的支持。在病毒学研究中,免疫沉淀用于分离病毒抗原,为疫苗开发及病毒检测提供关键支持。

首先,样品(如细胞裂解液或组织提取物)需要经过适当的处理,以确保目标蛋白的可溶性和稳定性。接下来,特异性抗体与样品中的目标蛋白结合,形成抗原-抗体复合物。为了提高实验的特异性和效率,通常会使用经过预处理的固相载体(如ProteinA/G琼脂糖珠)来捕获复合物。经过多次洗涤去除非特异性结合的蛋白后,目标蛋白可以通过改变缓冲液条件(如pH值或添加还原剂)从固相载体上洗脱下来。免疫沉淀技术的成功依赖于抗体的质量和特异***毒研究中,免疫沉淀可分离病毒抗原,为病毒检测技术与抗病毒药物研发打基础。南京RIP免疫沉淀磁珠原理

蛋白质组学研究依赖免疫沉淀,借此鉴定蛋白间相互作用,解析复杂生命活动机制。苏州Co IP免疫沉淀磁珠价格

在生命科学的研究领域中,免疫沉淀技术宛如一把神奇的钥匙,为我们开启了探索生物分子奥秘的大门。免疫沉淀的原理基于抗原与抗体之间的特异性结合。抗体就如同精细的导航导弹,能够识别并紧紧结合目标抗原。当我们将含有目标抗原的细胞裂解液与特定抗体混合时,抗体便会迅速找到对应的抗原,形成抗原 - 抗体复合物。随后,通过添加与抗体具有特异性结合能力的固相载体,如 Protein A/G 磁珠,就能将这些复合物从复杂的细胞裂解液中分离出来。苏州Co IP免疫沉淀磁珠价格

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