纺锤体,顾名思义,其形状类似于纺织用的纺锤,是在细胞分裂前初期到末期形成的一种特殊细胞器。它的主要元件包括微管、附着微管的动力分子分子马达,以及一系列复杂的超分子结构。微管是纺锤体的基础骨架,由αβ-微管蛋白二聚体组成,这些微管相互交错,形成纺锤状结构,将染色体紧密地联系在一起。在动物细胞中,纺锤体的形成和组装通常由中心体引导和控制。中心体是一个位于细胞质中的复合体,由两个中心粒嵌套在被称为pericentriolarmaterial(PCM)的区域内组成。PCM富含微管相关蛋白和其他蛋白质,如谷氨酸脱羧酶等微管主要蛋白,这些蛋白质共同协作,确保纺锤体的正确组装和稳定。相比之下,高等植物细胞的纺锤体并不包含中心体,而是由细胞极板附近的微管组织形成。纺锤体的形成与消失是细胞周期中高度动态的过程。北京成熟卵母细胞纺锤体

无需染色纺锤体观察技术能够实时监测冷冻过程中纺锤体的形态变化,从而准确评估冷冻保存的效果。通过对比冷冻前后纺锤体的形态和稳定性,研究者可以优化冷冻保护剂的配方和浓度,以及改进冷冻程序,减少冷冻损伤,提高解冻后卵母细胞的存活率和发育潜能。解冻后的卵母细胞在无需染色的情况下,可以直接通过Polscope系统进行纺锤体观察。这一技术能够迅速评估解冻后卵母细胞的质量,包括纺锤体的形态、位置、稳定性等关键指标,为后续的受精和胚胎发育提供重要参考。昆明核移植纺锤体改善分级纺锤体在细胞分裂中的精确调控是生物体发育的基础。

纺锤体是如何形成的(2)
动粒微管连接染色体动粒与位于两极的中心体。在有丝分裂前期,一旦核被膜解聚,由相反两个方向的中心体伸出的动粒微管就会随机地与染色体上的动粒结合而俘获染色体,微管**终附着在动粒上,动粒微管把染色体和纺锤体连接在一起。在细胞分裂期的后期,分开后的染色单体被拉向两极。染色体移动由两个相互独立且同步进行的过程所介导,分别为过程A和过程B。在过程A中,在连接微管和动粒的马达蛋白的作用下,动粒微管解聚缩短,在动粒处产生的拉力使染色体移向两极。极间微管是从一个中心体伸出的某些微管与从另一个中心体伸出的微管相互作用,阻止了它们的解聚,从而使微管结构相对稳定,两套微管的这种结合形成了有丝分裂纺锤体的基本框架,具有典型的两极形态,产生这些微管的两个中心体称为纺锤极,这些相互作用的微管被称为极间微管。在有丝分裂后期过程B中,极间微管的伸长和相互间的滑行使纺锤极向两极方向移动。星体微管从中心体向周围呈辐射状分布,在有丝分裂后期过程B中,每一纺锤极上向外伸展的星体微管发出向外的力,拉动两个纺锤极向两极方向移动。
在卵母细胞冷冻保存过程中,纺锤体的形态变化是评估冷冻效果的重要指标之一。传统的纺锤体观察方法往往需要将卵母细胞固定并进行免疫荧光染色,这不仅破坏了细胞的活性,还限制了进一步观察其发育潜能的机会。而偏光成像技术则能够在不解冻、不染色的情况下,直接观察纺锤体的形态变化。通过Polscope系统,研究者可以实时监测冷冻过程中纺锤体的形态变化,评估冷冻保护剂对纺锤体的保护效果,以及解冻后纺锤体的恢复情况。冷冻后的卵母细胞纺锤体及染色体异常率增高,这将直接影响解冻后卵母细胞的减数分裂进程和胚胎的染色体正常性。利用偏光成像技术,研究者可以准确评估冷冻前后纺锤体的异常率,包括纺锤体的形态、位置、稳定性等参数。通过对比分析,可以明确冷冻过程对纺锤体的具体影响,为优化冷冻保存条件提供科学依据。纺锤体在细胞分裂后期通过收缩力推动染色体分离。

在生殖医学领域,卵母细胞冷冻保存技术作为辅助生殖技术的重要组成部分,近年来取得了进展。尤其是针对成熟卵母细胞纺锤体的冷冻保存研究,不仅关乎女性生育能力的保存,还涉及到遗传学的稳定性和安全性。成熟卵母细胞,即处于第二次减数分裂中期(MII期)的卵母细胞,其内部包含一个高度复杂且精细的纺锤体结构。纺锤体由微管组成,这些微管通过动态变化,将染色体紧密地联系在一起,并确保在细胞分裂过程中染色体的正确分离。成熟卵母细胞的纺锤体对温度变化和机械刺激极为敏感,这使得其冷冻保存过程充满了挑战。纺锤体的形成与细胞骨架的重构密切相关。上海卵母细胞纺锤体玻璃底培养皿
纺锤体在细胞分裂完成后迅速解体,为细胞进入下一个周期做准备。北京成熟卵母细胞纺锤体
纺锤体观测仪使ICSI更加安全可靠
在进行单精子卵胞浆内注射(ICSI)授精时,**初人们观察人体内成熟的卵母细胞时,通常认为,卵母细胞纺锤**于***极体附近,故传统的ICSI操作是转动卵母细胞使其***极**于6点或12点处,然后在3点处注入精子。但是,在大量使用纺锤体观测仪后发现,***极体并不能很好地预测纺锤体的位置。一项研究提示,在ICSI后,用纺锤体观测仪观察纺锤体与***极体的夹角,结果发现小于30°这组卵母细胞的正常受精率更高。极体在卵周隙中的移动,或者纺锤体在胞质中的易位都使两者的位置关系发生改变,普通光学显微镜下ICSI穿刺部位的选择,可能会损伤纺锤体和(或)造成染色体的异常。通过纺锤体观测仪,可以精确地对卵母细胞中纺锤体的位置进行定位,从而避免在ICSI过程中损伤纺锤体,使ICSI更加安全可靠。有文献报道,在进行ICSI时,观察到“双折射纺锤体”的成熟卵母细胞的受精率和质量胚胎率***高于未观察到双折射纺锤体组。也有学者发现,有些卵母细胞在普通光学显微镜下看到是正常的,但在纺锤体观测仪这个“照妖镜”下,就能显出原形,表现为有***极体、但缺乏双折射的纺锤体,这类卵母细胞ICSI后的受精率和妊娠率极低。 北京成熟卵母细胞纺锤体
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