通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向运动精子百分率上的相关性较低]。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较,其结果为:采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数;变异系数(CV)是29%活动精子比率的CV为24%平均路径速度(VAP)的CV为43∙85%。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术(授精IVF)的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能;同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。Hamilton Thorne精子分析仪具有良好的数据管理和报告生成功能,能够方便用户查阅和分享分析结果。南京全自动化精子分析ALH

精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后,滴于血细胞计数板上,在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。将已经液化的精液标本均匀混合,用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀释液至11刻度,振荡三分钟,然后置于血球计数板内,计数二大格(每格面积1平方毫米)之精子数,在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个,则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制:重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用,福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时,可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内,稀释后进行计数。如精子的数目极少,亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的,还有25%是由输精管道的其他部分来的,因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查,才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。上海CASA精子分析VCLCASA系统主要用于精子动力学的分析,可以评估精子的浓度、活力等参数。

通过比较进行质量评估1.室内比较是采用同一个标本在同一参数下经CASA多次测定后应用适当的统计学方法对测得数值进行比较。在男科实验室中对CASA系统的质量控制通常使用影像磁带或完全相同的冻存**标本进行日间比较。当室内比较作为结果质量的一种评估时计算机中数值的在线获得是极具优势的。2.室间比较要求标本向其他几个实验室运送文献中的一些报道阐述了该方面的经验但是运动精子是不能在不受限制的条件下运输的将其置于液氮中运送需进一步考虑更多的因素(解冻技术、标本的处理等)这些因素会影响活动力参数;到目前为止室间比较的研究还未见满意报道;Jorgensen等进行了研究尝试克服实验室间运送解冻标本的困难其研究方式是:邀请四个实验室的实验人员携带各自的仪器到同一个地点以各自通常采用的实验方法进行精子评估但未见明确的结论。3.对于精子活力测定CASA系统的测定与直观评估的比较有文献进行了报道但结果并不相同。认为直观评估揭示标准数值且其差异是由CASA系统的错误引起的该观点是不正确的;无论从理论上还是实践中CASA数值比直观评估所获得的数值更接近于真值;对直线前进的精子比例而言这一点是非常正确的。
精子分析仪使用注意事项1.样品制备是CASA取得高质量检查结果的关键。CASA采用深度为10um样品池,能保证精子在单层界面内自由运动。取样分析前标本必须充分混匀,用微量取液器取5~7ul**加入样品池中,用0.5mm厚皿盖片盖紧。2.不洁净的计数池可影响精子的活力,尤其影响灰度CASA精子计数的准确性。3.精子样品密度过大时,造成图像处理上的粘连,无法分析每个精子的运动特性。**中所含精子太少时,需增加检查视野数量或者使用低倍物镜观察,以提高样品检出率。精子分析可以分析参数有,曲线速率(VCL):精子头沿其实际曲线运动的时均速率。

精液显微镜检查(1)精子存活率:排精后30~60分钟,正常精子存活率应为80%~90%,精子存活率降低是导致不育的重要原因。(2)精子活动力:指精子活动状态,也是指活动精子的质量。世界卫生组织(WHO)推荐将精子活动力分为4级:①精子活动好,运动迅速,活泼有力,直线向前运动;②精子活动较好,运动速度尚可,游动方向不定,呈直线或非直线运动,带有回旋;③精子运动不良,运动迟缓,原地打转或抖动,向前运动能力差;④死精子,精子完全不活动。正常精子活动力应在③级以上,若>40%的精子活动不良(③、④)级,常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低,主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性***,应用某些药物如抗疟药、雄***等所致。在男科和辅助生殖技术领域,精子质量的评估是诊断和处理的重要环节。广州计算机辅助精子分析ALH
HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,鞭打频率(BCF):精子曲线路径跨越其平均路径的平均频率。南京全自动化精子分析ALH
九、精液酸碱度(pH)检查[正常参考值]7.2-8.0。[临床意义]1.精液pH值<7.0,多见于少精或无精症,常反映输精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睾病变等。2.精液pH值>8.0,常见于急性***,如精囊炎、前列腺炎等。十、男性生育力指数测定[计算公式]I=M(N×V)/(A×106)式中I为男性生育力指数;M为活动精子百分率;N为每毫升的精子数;V为精子运动的速度;A为畸形精子的百分率。[正常参考值]正常人生育力指数>l。[临床意义]1.生育指数为0,表明完全无生育能力。2.生育指数为0-1之间,表明有不同程度的生育障碍。南京全自动化精子分析ALH
九、精液酸碱度(pH)检查[正常参考值]7.2-8.0。[临床意义]1.精液pH值<7.0,多见于少...
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