CASA,即计算机辅助精子分析,是一种利用技术手段对精子活力、浓度和形态进行精确评估的方法。WHO第五版指南强调,相比人工检测,CASA提供更准确的数据和精子动力学参数,如前向运动和超活化运动,以及获能精子特征参数。研究显示,CASA检测的精子参数与体内外受精成功率和受孕时间有***关联。使用CASA分析仪,通常通过相差显微镜识别活动精子,适用于精子动力学分析。但要确保可靠结果,操作者需注意标本制备、帧频率、精子浓度等因素。每份样本至少需要分析200个活动精子的运动轨迹,更多精子样本有助于分类和变异性的分析。国内已有自主研发的精子分析仪,通常进行两次分析,每次至少200个精子,结果通过统计学分析得出。CASA在评估精子浓度时,需精确测量精子体积,确保**完全液化并充分混匀。计数板的精确性和计数一致性是关键,每次检测需满足5个视野和200条以上精子的比较低要求。对于高浓度**,可能需要稀释以减少误差。形态分析方面,CASA能够定量评估精子头部、中段和主段,尾部缺陷可通过活力评估。对于碎片过多或黏稠的**,可能需要洗涤以减少背景干扰。CASA中涉及一系列术语,如VCL(曲线速度)、VSL(直线速度)等,它们反映了精子运动的不同特性。IVOS具有高分辨率和高灵敏度的特点,能够捕捉到微小的细节和变化,进一步提高了精子分析的准确性。香港前向运动精子分析VSL
前沿性检查:目前不作为生育力低下男性初步评估的常规方法。这一部分包括了非常专业化的、主要用于研究的方法和其他新兴检测技术。有研究认为,氧化应激可能是影响人类精子功能和妊娠结局的重要因素;新的证据也表明了精子DNA完整性和染色质组装与生育力的关系。前沿性检查一节中详细介绍了精子氧化应激和活性氧实验、精子染色质检测(苯胺蓝和色霉素A3染色)的具体实验操作及讨论。手册重写了计算机辅助精子分析(CASA)部分,强调了CASA对于检测精子浓度的局限性与质控要求,增加了CASA检测精子超活化运动的内容。对精子跨膜离子流和转运的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。为此,手册新增了检测精子跨膜离子流和转运的内容。美国慢速运动精子分析W.H.O 4HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,摆动性(WOB):实际的曲线路径关于平均路径的摆动值。
通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向运动精子百分率上的相关性较低]。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较,其结果为:采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数;变异系数(CV)是29%活动精子比率的CV为24%平均路径速度(VAP)的CV为43∙85%。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术(授精IVF)的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能;同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。
CASA精子运动速度和运动轨迹特征主要参数有:①轨迹速度(VCL):也称曲线速度,即精子头部沿其实际行走曲线的运动速度。②平均路径速度(VAP):精子头沿其空间平均轨迹的运动速度,这种平均轨迹是计算机将精子运动的实际轨迹平均后计算出来的,可因不同型号的仪器而有所改变。③直线运动速度(VSL):也称前向运动速度,即精子头部直线移动距离的速度。④直线性(LIN):也称线性度,为精子运动曲线的直线分离度,即VSL/VCL。⑤精子侧摆幅度(ALH):精子头实际运动轨迹对平均路径的侧摆幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型号的CASA系统由于计算方法不一致,因此相互之间不可直接比较。⑥前向性(STR):也称直线性,计算公式为VSL/VAP,亦即精子运动平均路径的直线分离度。⑦摆动性(WOB):精子头沿其实际运动轨迹的空间平均路径摆动的尺度,计算公式为VAP/VCL。⑧鞭打频率(BCF):也称摆动频率,即精子头部跨越其平均路径的频率。⑨平均移动角度(MAD):精子头部沿其运动轨迹瞬间转折角度的时间平均值。⑩运动精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子数。HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,鞭打频率(BCF):精子曲线路径跨越其平均路径的平均频率。
医生处置质量是指诊断质量是以当今医学科学知识、技术为基础依据症状来完成的。CASA系统可以为医生提供优于传统精子分析的手段和快速准确的分析结果[5]。CASA在医生处置质量方面的特点在于:①当CASA系统的参数设定和样品的处理方式(温度、稀释法、缓冲液)确定时通过个体内和个体间的比较CASA的精子活力重复性明显好于直观评估[6]。②实验室数据资料是质量的一部分CASA系统所有数据都是直接在线获得的因此明显优于其他方法[6]记录传递到数据库的过程无错误发生可清楚准确地打印出结果。所有的数据可直接转换到数据库、能够对***前和***后测定的数据进行统计学比较[9]、质量控制数据的采集与保存、每天的标本测试记录以及许多其他报告等等如此大量数据的处理只有在计算机中才能完成。但是CASA系统的参数设定也许限制了其质量特别是在精子形态学检查中通过CASA系统对精子形态学特征进行分析[7]这些特征(细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它)可由操作者选择这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差[8]。就形态学分析而言传统方法的可变性远远大于CASA分析。精子分析仪因其高效、J准的特点,已经在众多医疗机构中广泛应用,深受患者信赖。香港前向运动精子分析VSL
全自动精子分析仪在临床Z疗中展现了明显的优势。香港前向运动精子分析VSL
二、生化及免疫学检验:1、精浆果糖测定【正常参考值】9.11-17.67mmol/L。【临床意义】(1)精液果糖为0,可见于先天性两侧输精管及精囊腺缺如、两侧输精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常见于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可导致精子运动能量缺乏,甚至不易受孕。2、精浆酸性磷酸酶测定【正常参考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【临床意义】(1)精浆酸性磷酸酶含量增高,常见于前列腺肥大或早期前列腺恶性**患者。(2)精浆酸性磷酸酶含量降低,常见于前列腺炎患者。(3)精浆酸性磷酸酶检测是法医鉴定有无精液**敏感的方法。3、精浆顶体酶活性测定【正常参考值】36.72±21.43U/L。【临床意义】精子顶体酶活力与精子密度及精子顶体完整率呈正相关,其活力不足,可导致男性不育。4、精浆乳酸脱氢酶-X同功酶(LDH-X)测定【正常参考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相对活性:≥0.426。【临床意义】LDH-X具有睾丸及精子的组织特异性,是精于运动获能的关键酶,该酶检测可作为诊断男性不育有价值的指标。睾丸萎缩患者LDH-X降低或消失,精子发生缺陷时无LDH-X形成,少精或无精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。香港前向运动精子分析VSL
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