在生殖医学领域,卵母细胞冷冻保存技术作为辅助生殖技术的重要组成部分,近年来取得了进展。尤其是针对成熟卵母细胞纺锤体的冷冻保存研究,不仅关乎女性生育能力的保存,还涉及到遗传学的稳定性和安全性。成熟卵母细胞,即处于第二次减数分裂中期(MII期)的卵母细胞,其内部包含一个高度复杂且精细的纺锤体结构。纺锤体由微管组成,这些微管通过动态变化,将染色体紧密地联系在一起,并确保在细胞分裂过程中染色体的正确分离。成熟卵母细胞的纺锤体对温度变化和机械刺激极为敏感,这使得其冷冻保存过程充满了挑战。纺锤体的形成需要多种蛋白质的参与,包括微管相关蛋白和中心体蛋白等。香港Hamilton Thorne纺锤体Oosight Basic

纺锤体的完整性决定了染色体分裂的正确性。在有丝分裂前期,中心体被复制形成两个中心体,并逐渐分离,形成两个纺锤体。纺锤体的微管从中心体发出,与染色体上的着丝粒(kinetochore)结合。着丝粒是一组复杂的蛋白质结构,可以与微管的末端结合。当纤维束的微管末端与着丝粒结合时,纤维束开始缩短,将染色体拉向两端,实现染色体的精确分离。这一过程不仅确保了每个新细胞都能获得正确数量的染色体,还保证了遗传信息的稳定传递。上海双折射性纺锤体厂家纺锤体微管与染色体上的动粒结合,形成稳定的连接。

在生殖医学领域,卵母细胞的冷冻保存技术一直是研究的热点,旨在提高女性生育能力的保存与利用。然而,传统的纺锤体观察方法往往需要对卵母细胞进行固定和染色处理,这不仅破坏了细胞的活性,还限制了对其发育潜能的深入评估。偏光成像技术,特别是Polscope偏振光显微成像系统,通过利用纺锤体微管结构的双折射性,实现了对纺锤体的无损观察。这种技术无需对卵母细胞进行固定和染色,能够在保持细胞活性的同时,实时、动态地观察纺锤体的形态和变化。这不仅提高了观察的准确性和可靠性,还避免了传统染色方法可能带来的细胞损伤和误差。
近年来,随着成像技术的飞速发展,特别是纺锤体成像技术的不断进步,科学家们得以在高分辨率下观测细胞分裂过程,从而揭示了纺锤体的许多未知特征和机制。纺锤体成像技术的发展可以追溯到上世纪末,当时科学家们开始利用荧光显微镜技术观测细胞分裂过程。然而,由于传统荧光显微镜的分辨率限制,纺锤体的精细结构和动态变化往往难以被清晰捕捉。为了克服这一难题,科学家们开始探索更高分辨率的成像技术,如电子显微镜、超分辨率显微镜等。然而,这些技术在实际应用中面临着诸多挑战,如样品制备复杂、成像速度慢、对细胞活性影响大等。近年来,随着成像技术的不断创新和进步,纺锤体成像技术取得了突破性进展。特别是超分辨率显微镜技术的出现,如结构光照明显微镜(SIM)、受激辐射损耗显微镜(STED)和单分子定位显微镜(SMLM)等,使得科学家们能够在纳米尺度上观测纺锤体的精细结构和动态变化。 显微镜下的纺锤体,如同精密的分子机器,引导染色体分离。

为了减少冷冻过程中纺锤体的损伤,研究者们尝试在冷冻液及解冻液中添加细胞骨架保护剂,如紫杉醇(Taxol)。紫杉醇能够稳定微管结构,防止其在低温下解聚。通过偏光成像技术,研究者可以实时监测紫杉醇对纺锤体的保护效果,评估其在冷冻保存过程中的作用机制。此外,还可以进一步观察解冻后卵母细胞的发育潜能,为临床应用提供可靠依据。无需对细胞进行固定和染色,保持细胞的活性与完整性。能够实时监测纺锤体的形态变化,评估冷冻效果。能够捕捉到细微的纺锤体形态变化,提高评估的准确性。纺锤体在细胞分裂后期通过微管切割机制实现染色体分离。美国偏光成像纺锤体玻璃底培养皿
纺锤体的中心体在细胞分裂前会复制并分离到细胞两极。香港Hamilton Thorne纺锤体Oosight Basic
纺锤体是如何形成的(2)动粒微管连接染色体动粒与位于两极的中心体。在有丝分裂前期,一旦核被膜解聚,由相反两个方向的中心体伸出的动粒微管就会随机地与染色体上的动粒结合而俘获染色体,微管**终附着在动粒上,动粒微管把染色体和纺锤体连接在一起。在细胞分裂期的后期,分开后的染色单体被拉向两极。染色体移动由两个相互独立且同步进行的过程所介导,分别为过程A和过程B。在过程A中,在连接微管和动粒的马达蛋白的作用下,动粒微管解聚缩短,在动粒处产生的拉力使染色体移向两极。极间微管是从一个中心体伸出的某些微管与从另一个中心体伸出的微管相互作用,阻止了它们的解聚,从而使微管结构相对稳定,两套微管的这种结合形成了有丝分裂纺锤体的基本框架,具有典型的两极形态,产生这些微管的两个中心体称为纺锤极,这些相互作用的微管被称为极间微管。在有丝分裂后期过程B中,极间微管的伸长和相互间的滑行使纺锤极向两极方向移动。星体微管从中心体向周围呈辐射状分布,在有丝分裂后期过程B中,每一纺锤极上向外伸展的星体微管发出向外的力,拉动两个纺锤极向两极方向移动。香港Hamilton Thorne纺锤体Oosight Basic
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