精子手工计数原理及操作方法1.原理：将精液用适当的稀释液作一定量稀释后，混匀注入计数池内计数，再算出每毫升精液中精子数。2.方法（按照***版第四版《全国临床检验操作规程》）1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式：精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/mlCASA系统减少了人为因素对检测结果的影响，提高了检测的客观性和可重复性。上海Hamilton Thorne精子分析ALH
CASA系统在男性生殖能力检验应用中的功能要求和参数设置CASA是将现代化的计算机技术和先进的图象处理技术应用于精子质量的临床检验，通过对精子动（静）态图象中精子特性的***分析，为临床提供有关精子质量各项指标的准确数据。CASA系统一般包括硬件和计算机软件支持系统几个部分：（1）相差显微镜、恒温装置和**技术板（Makler板、Macro板或MicroCell计数池等）；（2）高速、高分辨率的摄像机和电视监视器组成的摄像系统；（3）计算机分析处理系统及打印机打印输出。美国山羊精子分析BCFHAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数，直线性（LIN）：曲线轨迹的直线性。
在精子形态学检查中，通过CASA系统对精子形态学特征进行分析，有些特征（细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它）可由操作者选择，这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差[10]。4结论和展望计算机辅助**分析具有较好的可靠性、重复性和稳定性，与传统的光学显微镜目测估计相比，更具有快速方便、对比性强、便于交流等明显优点[11]，常规**检查无法测定精子微细运动特点，显示CASA在男性不育症诊断筛选中的优越性。王益鑫亦发现，部分手工**检查正常的不育患者，进行**全自动分析及生化检测，均发现明显异常[12]。因此，CASA系统在男性生殖能力检验方面具有重要的实际应用意义。
医生处置质量是指诊断质量是以当今医学科学知识、技术为基础依据症状来完成的。CASA系统可以为医生提供优于传统精子分析的手段和快速准确的分析结果［5］。CASA在医生处置质量方面的特点在于：①当CASA系统的参数设定和样品的处理方式（温度、稀释法、缓冲液）确定时通过个体内和个体间的比较CASA的精子活力重复性明显好于直观评估［6］。②实验室数据资料是质量的一部分CASA系统所有数据都是直接在线获得的因此明显优于其他方法［6］记录传递到数据库的过程无错误发生可清楚准确地打印出结果。所有的数据可直接转换到数据库、能够对***前和***后测定的数据进行统计学比较［9］、质量控制数据的采集与保存、每天的标本测试记录以及许多其他报告等等如此大量数据的处理只有在计算机中才能完成。但是CASA系统的参数设定也许限制了其质量特别是在精子形态学检查中通过CASA系统对精子形态学特征进行分析［7］这些特征（细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它）可由操作者选择这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差［8］。就形态学分析而言传统方法的可变性远远大于CASA分析。精子分析仪能分析与精子运动功能相关的各种参数。
通过比较进行质量评估1．室内比较是采用同一个标本在同一参数下经CASA多次测定后应用适当的统计学方法对测得数值进行比较。在男科实验室中对CASA系统的质量控制通常使用影像磁带或完全相同的冻存**标本进行日间比较。当室内比较作为结果质量的一种评估时计算机中数值的在线获得是极具优势的。2．室间比较要求标本向其他几个实验室运送文献中的一些报道阐述了该方面的经验但是运动精子是不能在不受限制的条件下运输的将其置于液氮中运送需进一步考虑更多的因素（解冻技术、标本的处理等）这些因素会影响活动力参数；到目前为止室间比较的研究还未见满意报道；Jorgensen等进行了研究尝试克服实验室间运送解冻标本的困难其研究方式是：邀请四个实验室的实验人员携带各自的仪器到同一个地点以各自通常采用的实验方法进行精子评估但未见明确的结论。3．对于精子活力测定CASA系统的测定与直观评估的比较有文献进行了报道但结果并不相同。认为直观评估揭示标准数值且其差异是由CASA系统的错误引起的该观点是不正确的；无论从理论上还是实践中CASA数值比直观评估所获得的数值更接近于真值；对直线前进的精子比例而言这一点是非常正确的。Hamilton Thorne自动精子分析仪具有高精度、高效率和自动化的优点。北京绵羊精子分析负相差
CASA系统通过计算机分析精子运动参数，能够提供精确的量化数据，优于人工检测方法。上海Hamilton Thorne精子分析ALH
七、精子形态检查[正常参考值]畸形精子：＜10%-15%；凝集精子：＜10%；未成熟精细胞：＜1%。[临床意义]1．精索静脉曲张病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟时已进入精液，或静脉回流不畅造成阴囊内温度过高和睾丸组织缺氧，或血液带有毒性代谢产物从肾或肾上腺静脉逆流至睾丸，上述原因均有损于精子形态。2.精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能异常。3.睾丸曲细精管生精功能受到药物或其他因素影响或伤害时，精液中可出现较多病理性未成熟精细胞。八、精液细胞检查[正常参考值]白细胞(WBC)：＜5个/HP(高倍镜视野)；红细胞(RBC)：0-偶见/HP。[临床意义]1．精液中白细胞增多，常见于精囊炎、前列腺炎及结核等。2．精液中红细胞增多，常见于精囊结核、前列腺*等。3.精液中若查到*细胞，对生殖系*有诊断意义。上海Hamilton Thorne精子分析ALH
九、精液酸碱度(pH)检查[正常参考值]7.2-8.0。[临床意义]1．精液pH值＜7.0，多见于少...
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