液相色谱理论
发展简况
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为经典液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography,HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography,HSLP)。也称现代液相色谱。
并不是在现有的UHPLC基础上进行改进,而是完全从头开始设计了这一全新的系统。浙江赛默飞世尔Vanquish液相色谱系统供应商高效液相色谱分离原理
离子
(Ion Chromatography)
用离子交换树脂为固定相,电解质溶液为流动相。以电导检测器为通用检测器,为消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰,设置了***柱。试样组分在分离柱和***柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。
以阴离子交换树脂(R-OH)作固定相,分离阴离子(如Br-)为例。当待测阴离子Br-随流动相(NaOH)进入色谱柱时,发生如下交换反应(洗脱反应为交换反应的逆过程):
***柱上发生的反应:
R-H Na OH- === R-Na H2O
R-H Na Br- === R-Na H Br-
可见,通过***柱将洗脱液转变成了电导值很小的水,消除了本底电导的影响;试样阴离子Br-则被转化成了相应的酸H Br-,可用电导法灵敏的检测。
离子色谱法是溶液中阴离子分析的比较好方法。也可用于阳离子分析。
安徽专业液相色谱系统一套设备可以同时实现在线分析与离线柱平衡再生,提升检测器或质谱在线利用率。
串联 LC 或 LC-MS应用提**析通量 Vanquish Duo系统
串联 LC 或 LC-MS 的 Vanquish Duo 系统将两个泵和两个色谱柱之间的分析分开。一个泵运行分析梯度,而另一个泵运行再生平衡梯度。您可通过该项配置,使用两个相同的色谱柱更快地运行序列,而不影响数据品质。
串联 LC 或 LC-MS(Thermo Scientific™ Q Exactive™ HF 组合型四极杆 Orbitrap™ 质谱仪)的Thermo Scientific™ Vanquish™ Horizon Duo UHPLC 系统的重现性结果,在此显示了五个总离子流色谱图的重叠图。采用 Thermo Scientific™ SMART™ 消化试剂盒消化英利昔单抗。
双LC应用 Vanquish Duo 系统:
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Chromeleon CDS为双LC的 Vanquish Duo系统提供了业界**的易用性。在同一界面上,通过完全可追溯且符合 21 CRF Part 11要求的所有操作,分别控制 Vanquish Duo系统的两个通道。
“该仪器在同时运行两种相同化学分离或者同时运行两种不同化学分离时,极大地提高了分析通量,使我们能够快速从同一样品中获取大量表征数据。”--Jonathan Bones 博士 国家生物加工研究和培训研究所(NIBRT)
在无需暂停实验更换溶剂的情况下,可实现多达九种不同溶剂组合。
双 LC 的 Vanquish Duo 系统更多细节
Vanquish Duo 系统可采用多种分析检测器,包括质谱(MS)、二极管阵列检测(DAD)、电雾式检(CAD)、可变波长检测(VWD)和荧光检测(FLD)。
简化维护步骤
模块化设计无需使用工具即可进行维护,并且可以在不拆卸堆叠设备的情况下进行维护,系统前端的智能灯条可提供即时系统状态更新。
保持实验室整洁
内置抽屉可存储配件、相关文档或系统的其他有用材料。
Vanquish™ UHPLC 色谱柱系列产品结合 Vanquish 平台提供了***的色谱分离性能。此外,所有 Vanquish UHPLC 阀门均具有生物兼容性,使用期限长,维护成本低,可满足 UHPLC 常规性及耐久性运行的性能要求。
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液相色谱类型
液相色谱按其分离机理,可分为四种类型--吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱、凝胶色谱法
吸附色谱法
吸附色谱法的固定相为吸附剂,色谱的分离过程是在吸附剂表面进行的,不进入固定相的内部。与气相色谱不同,流动相(即溶剂)分子也与吸附剂表面发生吸附作用。在吸附剂表面,样品分子与流动相分子进行吸附竞争,因此流动相的选择对分离效果有很大的影响,一般可采用梯度淋洗法来提高色谱分离效率。
在聚合物的分析中,吸附色谱一般用来分离添加剂,如偶氮染料、抗氧化剂、表面活性剂等,也可用于石油烃类的组成分析。
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