高效液相色谱相关术语
色谱峰(peak)——组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线（高斯Gauss曲线）。不对称色谱峰有两种：
前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。前者少见。
峰底—基线上峰的起点至终点的距离。
峰高(peak height，h)—峰的比较高点至峰底的距离。
峰宽（peak width，W)—峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ
半峰宽（peak width at half-height，Wh/2)—峰高一半处的峰宽。Wh/2=2.355σ
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高效液相色谱的历史
1903年俄国植物化学家茨维特（Tswett）***提出“色谱法”（Chromatography）和“色谱图”（Chromatogram）的概念。茨维特使用色谱法 chromatography 来描述他的彩色试验。
1930年以后，相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。
1952年，英国学者Martin和Synge 基于他们在分配色谱方面的研究工作，提出了关于气－液分配色谱的比较完整的理论和方法，把色谱技术向前推进了一大步，这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。
1958年，基于Moore和Stein的工作，离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现，这是近代液相色谱的一个重要尝试，但分离效率尚不理想。
1960年中后期，气相色谱理论和实践发展，以及机械、光学、电子等技术上的进步，液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。
1970年中期以后，微处理机技术用于液相色谱，进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。
1990年以后，生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展，为高效液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题，如人类基因组计划，蛋白质组学有HPLC作预分离等。
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高效液相色谱梯度洗脱
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提，就是载液中含有两种（或更多）不同极性的溶剂，在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性，通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素，以提**离效果。梯度洗提可以分为两种：
a.低压梯度（也叫外梯度）：在常压下，预先按一定程序将两种或多种不同极性的溶剂混合后，再用一台高压泵输入色谱柱。
b.高压梯度 ( 或称内梯度系统 ) ：利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按设定的比例送入梯度混合室，混合后，进入色谱柱。
高效液相色谱进样装置
⑴注射器进样装置：进样所用微量注射器及进样方式与 GC法一样。进样压力150×10^5Pa时，必须采用停流进样。⑵高压定量进样阀：与GC法用的流通法相似，能在高压下进样。
高效液相色谱色谱柱
色谱柱是色谱仪**重要的部件（心脏）。通常用厚壁玻璃管或内壁抛光的不锈钢管制作的，对于一些有腐蚀性的样品且要求耐高压时，可用铜管、铝管或聚四氟乙烯管。柱子内径一般为1～6 mm。常用的标准柱型是内径为4.6 或3.9mm ，长度为15 ～30cm 的直形不锈钢柱。填料颗粒度5 ～10μm ，柱效以理论塔板数计大约 7000 ～10000。
发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。 该系统应用灵活，性能***，分离可靠，满足实验室的需求，适用于从高通量分析到药品质控分析的方法开发。
双 LC 的 Vanquish Duo 系统更多细节
Vanquish Duo 系统可采用多种分析检测器，包括质谱（MS）、二极管阵列检测（DAD）、电雾式检（CAD）、可变波长检测（VWD）和荧光检测（FLD）。
多功能检测性能
从小分子到复杂生物大分子，根据分析物的分子特征不同，需要采用多种检测器。
双LC的Vanquish Duo系统可同时采用MS、DAD、VWD、FLD 和 CAD 等大量检测器产品中的任意两种检测器。
多功能色谱柱管理
更大的色谱柱容量（每个柱温箱内安装两个 30 cm 色谱柱或多个更短的色谱柱）以及**的温度范围和温度稳
定性。
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反梯度应用 Vanquish Duo 系统
提高定量分析水平，获取更多未知化合物信息
反梯度的 Vanquish Duo 系统可通过电雾式检测技术（CAD）为所有检测分析物提供一致的响应。等度分离可产生一致的 CAD 响应，但某些分离需要采用梯度洗脱导致相应不一致。Vanquish Duo系统通过使用第二个泵对检测器输送反向梯度，可实现：
• 采用 CAD 检测器在梯度洗脱条件下获得一致的响应
• 在无标准品的情况下，可靠地定量已知和未知化合物
• 通过自动反梯度计算功能考查所有系统体积，简化了方法设置
无论化合物何时在梯度中进行洗脱，进入检测器的洗脱液通过反梯度补偿功能，始终保持相同的溶剂组成。即使缺乏特定化合物的单个标准品，也能够可靠地为您提供一致的定量响应信息。
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