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标题:牛凝血酶(Bovine Thrombin)的高比活应用及其在生物医学研究中的重要性摘要牛凝血酶(Bovine Thrombin),一种高比活度的丝氨酸蛋白水解酶,具有>2000 IU/mg的特异性活性,广泛应用于生物医学研究和临床本文综述了牛凝血酶的分子特性、在血液凝固中的作用机制以及其在科研和工业生产中的应用。引言牛凝血酶是从牛血浆中提取的酶,分子量为37KD,由两条肽链(31KD和6KD)通过二硫键组成。作为凝血过程中的关键酶,牛凝血酶催化纤维蛋白原(fibrinogen)水解,形成纤维蛋白单体,进而促进血凝块的形成。由于其高度的序列专一性和水解效率,牛凝血酶不仅在生理止血中发挥作用,也作为分子生物学研究中的工具酶。材料与方法产品性质分析:分析牛凝血酶的CAS号、分子量、比活度、外观和纯度等物理化学性质。运输和保存方法:评估牛凝血酶的运输条件和长期储存稳定性。使用方法:探讨牛凝血酶在不同实验条件下的溶解、复溶和消化条件。在蛋白质的晶体学研究中,去除糖链可以帮助获得去糖基化的蛋白质,这有助于更清晰地解析蛋白质的三维结构。Recombinant Cynomolgus S100A9/MRP14 Protein,His Tag

Recombinant Cynomolgus S100A9/MRP14 Protein,His Tag,标准物质

Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门切割N-连接糖链的内切酶,用于糖生物学和蛋白质工程领域。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制、以及其在研究和临床应用中的潜力。引言N-连接糖基化是一种在真核细胞中普遍存在的蛋白质修饰方式,涉及将糖链添加到蛋白质的天冬酰胺残基上。Endo H作为一种内切酶,能够特异性地识别并切割N-连接糖链中的β-N-乙酰葡糖胺苷键,从而在蛋白质工程和生物制药中发挥重要作用。Endo H的结构特性Endo H通常来源于流感嗜血杆菌(Hemophilus influenzae),其分子质量约为50 kDa。该酶由两个结构域组成:一个负责识别糖链的催化结构域和一个有助于酶稳定性的非催化结构域。催化机制Endo H的催化机制涉及对N-连接糖链的特异性识别和切割。酶的活性位点含有多个氨基酸残基,这些残基与糖链的特定结构相互作用,导致酶对底物的高特异性。Endo H催化的糖苷键断裂是一水解反应,需要水分子的参与。Recombinant Cynomolgus S100A9/MRP14 Protein,His Tag肠激酶能够特异性识别并切割含有Aspartate-Aspartate-Aspartate-Lysine (DDDK) 序列的蛋白质。

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大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质,由于只需要简单的培养基和条件,因此费用低且方便。此外,除了无细胞表达,它是速度的系统,大肠杆菌倍增时间(约20min)比酵母(2h)、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说,在大肠杆菌中表达重组蛋白包括:1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌;2.培养细胞至对数生长期;3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后,相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的,以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类:E.coliRNA聚合酶转录的载体

Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门作用于糖链的内切酶,对研究蛋白质糖基化修饰具有重要意义。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制以及在糖生物学研究中的应用。引言蛋白质糖基化是一种普遍存在的翻译后修饰,对蛋白质的结构、稳定性和功能发挥着关键作用。Endo H是一种能够特异性识别并切割高甘露糖型N-连接糖链的内切酶,广泛应用于蛋白质糖基化分析。Endo H的结构特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量约为130 kDa。该酶具有一个催化中心,能够识别并切割特定的糖苷键。Endo H的三维结构尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些关键催化残基已被确定。催化机制Endo H通过水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)与N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之间的β-1,4糖苷键,从而释放高甘露糖型N-连接糖链。该过程不涉及辅因子,表明Endo H催化机制可能依赖于其活性位点的氨基酸残基。由于其在细胞外基质中的存在,透明质酸在细胞黏附、迁移、增殖和分化过程中扮演着关键角色。

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应用蛋白质糖基化分析Endo H常用于分析蛋白质的糖基化模式。通过Endo H处理,可以移除蛋白质上的高甘露糖型糖链,从而简化糖链结构,便于进一步的分析。生物制药在生物制药领域,Endo H用于改善重组蛋白药物的糖基化质量。通过调整培养条件和使用Endo H,可以优化蛋白质的糖链结构,提高药物的疗效和稳定性。疾病研究Endo H也在疾病相关蛋白质的糖基化研究中发挥作用。例如,肿瘤细胞表面的糖链结构与正常细胞不同,Endo H可用于研究这些变化及其在疾病进展中的作用。前景展望随着对蛋白质糖基化重要性认识的增加,Endo H的应用范围预计将进一步扩大。未来研究可能会集中在开发更高效、专一性的Endo H变体,以及探索其在个性化医疗和精细中的应用。结论Endo H作为一种重要的工具酶,在糖生物学研究和蛋白质工程中扮演着关键角色。深入理解其结构和功能,将有助于推动相关领域的科学进展和临床应用。泛素化是一种蛋白质翻译后修饰过程,涉及将泛素分子共价结合到靶蛋白上。这个过程由一系列酶促反应组成。Recombinant Human GLP-1R Protein,mFc Tag

跨膜蛋白的多功能性使它们成为理想的药物作用靶点,例如四次跨膜蛋白CD20、Claudin18.2。Recombinant Cynomolgus S100A9/MRP14 Protein,His Tag

Trop-2,alsoknownasepithelialglycoprotein-1antigen(EGP-1),isaproteinthatinhumansisencodedbytheTACSTD2gene.Mutationsofthisgeneresultingelatinousdrop-likecornealdystrophy,anautosomalrecessivedisordercharacterizedbyseverecornealamyloidosisleadingtoblindness.产品性质别名EGP1;EGP-1;TROP2;GA733-1;gp50;T16;TACSTD2;TROP-2;M1S1;TACD2UniprotNo.P09758表达区间及表达系统RecombinantBiotinylatedHumanTROP-2/TACSTD2ProteinisexpressedfromHEK293cellswithHistagandAvitagattheC-terminal.ItcontainsHis27-Thr274.分子量TheproteinhasapredictedMWof30.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto46-55kDabasedonTris-BisPAGEresult.纯度>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC活性ELISAData:ImmobilizedAnti-TROP-2Antibody,hFcTagat0.5μg/mL(100μL/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanTROP-2,HisTagwiththeEC50of24.1ng/mLdeterminedbyELISA.0EUper1μgoftheproteinbytheLALmethod.制剂Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally5%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.Recombinant Cynomolgus S100A9/MRP14 Protein,His Tag

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Recombinant Human ROBO4 Protein(His Tag)是解析血管生成调控机制的高活性工具蛋白。ROBO4属于跨膜受体家族,专一表达于血管内皮细胞,通过识别Slit2等配体稳定血管屏障、抑制病理性新生血管,在糖尿病视网膜病变与病转移中具有双重调控作用。该重组蛋白采用HEK293表达体系,保留天然胞外Ig-like结构域(氨基酸31-468),C端6×His标签确保一步Ni-NTA纯化后纯度≥98%(SDS-PAGE/HPLC验证)。体外实验显示,其可竞争性阻断Slit2诱导的内皮细胞迁移(IC₅₀=28 nM),并通过抑制VE-cadherin磷酸化增强血管完整性。低内...

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