T7EndonucleaseI(T7EI)是一种特殊的DNA内切酶,具有以下特点:1.**识别错配DNA**:T7EI能够识别并切割不完全配对的DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。2.**切割位点**:T7EI切割错配位点5'端的、第二或第三个磷酸二酯键。3.**灵敏度**:T7EI对错配DNA的识别非常灵敏,能够检测并切割单碱基和多碱基的错配。4.**应用**:T7EI常用于CRISPR/Cas9等基因编辑技术导致的基因突变的鉴定。它通过识别错配DNA来帮助鉴定基因编辑是否成功以及是否有非目标效应。5.**直接电泳检测**:T7EI的产物可以直接通过电泳进行检测,这使得它在实验操作中更为方便。6.**来源**:T7EI来源于大肠杆菌菌株,是一种麦芽糖结合蛋白(MBP)和T7核酸内切酶I(T7EI)的融合蛋白。7.**成本效益**:尽管T7EI在商业上使用时成本较高,但它在大规模样本测试中,尤其是在基因突变鉴定方面,提供了一种有效的筛选方法。8.**特殊注意事项**:T7EI能够识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA,但不能识别1bp的插入、缺失或突变。这些特点使得T7EndonucleaseI成为基因突变鉴定中一个非常有用的工具,尤其是在CRISPR/Cas9等基因编辑技术的应用中。UBE2L3作为泛素化途径中的关键酶,其在蛋白质降解、信号传导、细胞周期控制等重要内容有着作用。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque CD47 Protein,His Tag

T5核酸外切酶(T5Exonuclease)具有以下特点和技术应用:1.**降解方向**:T5核酸外切酶按照5'→3'方向降解双链或单链DNA。2.**起始消化位置**:T5核酸外切酶既能从单链或双链DNA的5'末端起始消化,也可以从线性或环状双链DNA的缺口(gap)或缺刻(nick)处起始消化。3.**对超螺旋双链DNA的作用**:T5核酸外切酶无法降解超螺旋双链DNA。4.**单链DNA核酸内切酶活性**:T5核酸外切酶还具有单链DNA核酸内切酶活性。5.**应用领域**:-用于Gibson组装,这是一种在恒温条件下有效连接带有多个重叠序列片段的技术。-从完全连接的环状双链DNA中去除不完全连接产物。-降解碱裂解质粒提取方法中产生的变性DNA,增加超螺旋DNA比例,提高DNA克隆和转染效率。-降解质粒样品中污染的线性化和切刻DNA。6.**操作条件**:推荐在37℃温育30分钟,之后加入EDTA至终浓度为20mM终止反应。7.**储存条件**:-25~-15℃保存,有效期3年。8.**注意事项**:避免起泡或剧烈搅拌、涡旋等操作,以防止本品失活。这些特点和技术应用使得T5核酸外切酶在分子生物学实验中,尤其是在DNA克隆和基因片段组装中,具有重要的应用价值。Recombinant Human IL-23R Protein,His TagUBE2L3与其他E2酶的区别在于它具有特定的结构特征,它包含一个高度保守的UBC结构域,这是E2酶家族的标志。

CUT&RUN和ChIC是两种用于研究蛋白质-DNA相互作用的技术,它们有一些关键的区别:1.**技术原理**:-**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:ChIC技术利用抗体将感兴趣的蛋白与ProteinA-MNase相结合来进行DNA切割。ChIC的优势在于使用TF特异性抗体系住MNase,并只在结合位点裂解。-**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:CUT&RUN技术则是在核的轻微MNase处理后释放单核小体和TF-DNA复合物,留下寡核小体。CUT&RUN通过在冰上进行简短的消化反应,在TF结合的MNase扩散到周边的基因组和裂解可接近的染色质之前在上清中恢复TF-DNA复合物。2.**操作步骤和简便性**:-**ChIC**:ChIC可能需要甲醛固定操作,这可能重新引入了ChIP-seq的一些问题,如交联导致的DNA和蛋白质的化学修饰。-**CUT&RUN**:CUT&RUN简化了操作步骤,使用磁珠固定细胞核,适用于新鲜和冷冻组织样本,缩短了生成DNA测序文库的时间(1-2天)。3.**背景信号和信噪比**:-**ChIC**:ChIC产生的背景信号可能较高,因为它可能涉及到非特异性的DNA切割。
在PCR实验中,确保引物与目标序列的完全特异性是至关重要的,这可以通过以下几个步骤实现:1.**基于已知序列设计引物**:根据目标DNA序列,使用计算机软件(如Primer3、Snapgene等)设计出两个互补的引物,以保证引物的特异性和准确性。2.**引物长度和Tm值**:通常选择引物长度为18-25个核苷酸,引物的Tm值(熔解温度)通常选择在50-60℃之间,以保证引物和目标DNA序列的稳定性。3.**避免与其他DNA序列的交叉反应**:使用BLAST等计算机软件进行引物特异性检查,确保引物只与目标序列互补,而不与其他非目标序列发生杂交。4.**避免引物自身结合**:设计引物时要避免引物之间自身结合,因为这会影响PCR反应的特异性和效率。5.**引物的3'端设计**:引物的3'端应避免富含GC,以确保与模板序列的稳定结合。同时,避免3'端存在序列,以防止形成引物二聚体。6.**避免内部二级结构**:设计引物时,应避免存在可能产生内部二级结构的序列,以保证引物与模板序列的结合。7.**使用在线工具进行引物特异性检验**:利用Primer-BLAST等在线工具设计引物,并进行特异性验证,确保引物只扩增特定目标序列。CRISPR/Cas12a 是一种单一的RNA引导的核酸内切酶,通过CRISPR/Cas9系统为靶向基因组工程提供了新的机会。

BsuDNAPolymerase(嗜热脂肪芽孢杆菌DNA聚合酶)在PCR中的应用具有多个优势,以下是一些关键点:1.**链置换活性**:BsuDNAPolymerase具有很强的链置换活性,这使得它非常适合于等温扩增技术,如重组酶聚合酶扩增(RPA)。在这些技术中,BsuDNAPolymerase可以快速、高效、特异性地扩增模板,在10到30分钟内将痕量的核酸模板(低至单拷贝)扩增至可以检出的水平。2.**高温稳定性**:BsuDNAPolymerase在高温下保持活性,这使得它在一些需要高温反应的实验条件下表现出色。3.**高灵敏度和特异性**:BsuDNAPolymerase在等温扩增中展现出高灵敏度,能够将微量核酸模板扩增到可检测水平。同时,它也具有高特异性,减少了非特异性扩增的风险。4.**简化的样品处理**:BsuDNAPolymerase可以直接对复杂样品进行扩增,无需事先进行复杂的核酸纯化和提取步骤,节省了时间和成本。5.**可扩增DNA和RNA**:BsuDNAPolymerase不仅可以扩增DNA,还可以直接扩增RNA,省去了额外的逆转录反应(cDNA合成)步骤,这对于RNA的检测和分析更加方便快捷。6.**无核酸外切酶和RNase残留**:BsuDNAPolymerase在生产过程中确保无核酸外切酶、切口酶及RNase残留,这有助于提高实验的准确性和重复性。FnCas12a可以识别不同的PAM序列,例如5'-TTN-3',这增加了它可以靶向的基因组区域 。Recombinant Human FGF8b Protein
Pfu DNA Polymerase的热稳定性和保真性使其在优化PCR条件时更为灵活,比如在GC含量较高的模板中。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque CD47 Protein,His Tag
BstDNAPolymerase,LargeFragment(嗜热脂肪芽孢杆菌DNA聚合酶大片段)是一种常用于分子生物学实验的酶,特别是在等温DNA扩增技术中。以下是一些关于BstDNAPolymerase,LargeFragment的关键信息:1.**来源**:这种酶来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus),是一种热稳定的DNA聚合酶。2.**活性**:BstDNAPolymerase,LargeFragment具有5'到3'的DNA聚合酶活性,并且具有链置换活性,这使得它能够用于等温扩增反应,如环介导等温扩增(LAMP)。3.**热稳定性**:由于其嗜热特性,BstDNAPolymerase,LargeFragment能够在较高的温度下保持活性,通常在60-65°C。4.**应用**:-**等温扩增**:用于LAMP和其他等温扩增技术,这些技术不需要传统的热循环仪。-**全基因组扩增**:用于快速扩增少量DNA样本,以进行进一步的分析。-**突变检测**:在某些情况下,用于检测特定基因的突变。5.**优点**:-**高保真度**:与某些其他DNA聚合酶相比,BstDNAPolymerase,LargeFragment具有较高的保真度。-**快速扩增**:等温扩增技术可以在短时间内快速产生大量DNA。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque CD47 Protein,His Tag
TaqDNA聚合酶:分子生物学的“明星酶”TaqDNA聚合酶是一种从嗜热菌Thermusaquaticus中分离得到的耐热性DNA聚合酶,因其独特的耐高温特性和高效的DNA合成能力,成为分子生物学领域不可或缺的工具。该酶在PCR(聚合酶链式反应)技术中发挥着重要作用,极大地推动了基因扩增、测序和诊断技术的发展。TaqDNA聚合酶具有5→3聚合酶活性和5→3外切酶活性,但缺乏3→5外切酶活性,这使得它在DNA合成过程中能够快速延伸引物,同时在PCR产物的3端添加一个突出的A碱基,便于后续的克隆操作。此外,Taq酶的耐热性使其能够在PCR的高温变性步骤中保持稳定,从而实现高效的循环扩增。近年来,科...