微球菌核酸酶

SYBR Green I核酸染料10000×：性能助力科研突破SYBR Green I是一种广泛应用于核酸分析的荧光染料，以其性能和安全性在科研领域备受青睐。其10000×高浓度配方为实验提供了更高的灵活性和便利性。高灵敏度与特异性SYBR Green I是一种高灵敏度的dsDNA荧光染料，能够与双链DNA的小沟结合，荧光信号增强800-1000倍。在qPCR等实验中，其检测灵敏度可达20 pg DNA，比传统溴化乙锭（EB）染色高出25-100倍。这种高灵敏度使其在低拷贝数的核酸检测中表现出色，尤其适用于珍贵样本的分析。安全与环保与传统的EB染料相比，SYBR Green I属于花青类染料，无致病性，使用更加安全环保。这一特性使其成为实验室中理想的替代品，尤其适合频繁接触染料的研究人员。广泛的应用场景SYBR Green I适用于多种科研应用，包括凝胶电泳、qPCR、等温扩增、流式细胞术以及精子膜完整性评估等。在凝胶电泳中，它支持预染和后染两种方法，操作简便，无需脱色或冲洗。此外，其在qPCR中的表现也十分出色，能够提供准确的定量结果。Ultra-Long Master Mix 在分子生物学实验中的应用主要集中在需要扩增长片段DNA序列的场合。微球菌核酸酶

牛痘DNA拓扑异构酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）在实验室中的使用主要涉及以下几个步骤：1.**DNA载体连接**：-牛痘DNA拓扑异构酶I可以用于DNA载体连接，特别是在TOPO克隆载体制备中。它能够识别并切割双链DNA末端[5’C(T)CCTT]，并与DNA形成共价连接形成稳定复合物，遇到DNA的5’-OH基团后，重新连接形成完整DNA链。2.**接头连接**：-在NGS建库中，牛痘DNA拓扑异构酶I可用于接头连接。这包括将含有特定序列的接头A和接头B与酶一起孵育，以实现DNA片段的连接。3.**操作步骤**：-**质粒解旋**：将超螺旋质粒DNA与牛痘DNA拓扑异构酶I混合，在37°C下孵育5-15分钟，以实现质粒的解旋。-**接头连接**：将接头A（含CCCTT序列）和接头B（含5’OH）与牛痘DNA拓扑异构酶I混合，在37°C下孵育5-15分钟，以实现接头的连接。4.**注意事项**：-双链接头A通常5’端做NH2封闭修饰，以防止自连接；接头A的CCCTT后通常包含5-12bp尾巴，再长的尾巴会导致连接效率大幅下降。-双链接头B的5’端必须包含-OH。-由于该酶应用广，在不同的实验中使用策略不同，需要灵活运用，并根据具体文献进行调整。

PrP (106-126)通过SDS-PAGE、Western blot、质谱等方法验证蛋白的纯度和分子量。通过活性测试评估蛋白的生物活性。

T5核酸外切酶（T5Exonuclease）具有以下特点和技术应用：1.**降解方向**：T5核酸外切酶按照5'→3'方向降解双链或单链DNA。2.**起始消化位置**：T5核酸外切酶既能从单链或双链DNA的5'末端起始消化，也可以从线性或环状双链DNA的缺口(gap)或缺刻(nick)处起始消化。3.**对超螺旋双链DNA的作用**：T5核酸外切酶无法降解超螺旋双链DNA。4.**单链DNA核酸内切酶活性**：T5核酸外切酶还具有单链DNA核酸内切酶活性。5.**应用领域**：-用于Gibson组装，这是一种在恒温条件下有效连接带有多个重叠序列片段的技术。-从完全连接的环状双链DNA中去除不完全连接产物。-降解碱裂解质粒提取方法中产生的变性DNA，增加超螺旋DNA比例，提高DNA克隆和转染效率。-降解质粒样品中污染的线性化和切刻DNA。6.**操作条件**：推荐在37℃温育30分钟，之后加入EDTA至终浓度为20mM终止反应。7.**储存条件**：-25～-15℃保存，有效期3年。8.**注意事项**：避免起泡或剧烈搅拌、涡旋等操作，以防止本品失活。这些特点和技术应用使得T5核酸外切酶在分子生物学实验中，尤其是在DNA克隆和基因片段组装中，具有重要的应用价值。

ExoIII（ExonucleaseIII）和Lambda核酸外切酶（λExonuclease）在DNA末端处理上的主要不同点如下：1.**作用方向**：-**ExoIII**：具有3'→5'外切脱氧核糖核酸酶活性，它从DNA链的3'-OH末端逐步切去单核苷酸。-**Lambda核酸外切酶**：是一种5'→3'核酸外切酶，能选择性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的双链DNA。2.**底物特异性**：-**ExoIII**：适底物是平末端或5'末端突出的DNA，但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性，因此难以切割3'突出末端。-**Lambda核酸外切酶**：适底物是5'磷酸化的双链DNA，对单链DNA和5'端未磷酸化修饰的DNA的酶切活性较低，不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。3.**活性差异**：-**ExoIII**：对具有3'-突出末端(至少有4个碱基，且具有3'-末端C残基)的DNA、单链DNA、硫代磷酸酯连接的核苷酸无活性。-**Lambda核酸外切酶**：对5'-OH端的切割速度比5'-P端慢约20倍；对单链DNA的酶切速度比双链DNA慢约100倍。4.**应用场景**：-**ExoIII**：可以用于生产特定方向的单链DNA，将线性化DNA设计成为一端为不切割末端（3'突出端），另一端则设计为易切割末端（平端或5'突出端）。

一、主要特点：免提取与高兼容性Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一种专为血液样本设计的高效PCR预混液，能够直接从全血或干血斑中扩增DNA，无需进行繁琐的DNA提取和纯化步骤。这种预混液含有高保真DNA聚合酶（如HemoTaq™或Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase），这些酶经过优化，能够耐受血液中的各种抑制剂，包括抗凝剂（如EDTA、肝素、柠檬酸钠）和滤纸中的化学物质。此外，该预混液还具备的模板兼容性，能够从多种抗凝剂保存的血液样本中直接扩增DNA，适用于人类、小鼠等哺乳动物的全血样本。二、性能：高保真性与长片段扩增Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)的优势之一是其高保真性。其DNA聚合酶的保真性高于普通Taq酶，接近Pfu DNA聚合酶，能够确保扩增产物的准确性。这对于需要高精度的基因克隆和测序实验尤为重要。此外，该预混液能够扩增长达5kb甚至更长的DNA片段，适用于多种复杂的基因组分析。例如，它可以轻松扩增人类基因组中的长片段，如IL-6基因的4882bp片段。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 是一种即用型的预混合PCR反应液为高特异性高灵敏度的PCR扩增设计。Recombinant Cynomolgus Serum Albumin Protein,His Tag

Phusion DNA Polymerase的错误率比Taq DNA聚合酶低50倍，比Pyrococcus furiosus DNA聚合酶低6倍。微球菌核酸酶

核酸内切酶VIII（EndonucleaseVIII）和核酸内切酶III（EndonucleaseIII）都是DNA修复酶，但它们之间存在一些关键的区别：1.**活性类型**：-**核酸内切酶VIII**：具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。N-糖基化酶活性可以释放受损的嘧啶碱基，如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇，产生一个脱嘌呤(Apurinic,AP)位点；AP裂解酶活性可以切割AP位点的3'和5'端，产生一个具有3'和5'磷酸的碱基缺口(Gap)。-**核酸内切酶III**：主要具有β裂解酶(β-lyase)活性，能够切割DNA磷二酯骨架在AP位点处，但不具备δ裂解酶(δ-lyase)活性。2.**识别和切除的受损碱基**：-**核酸内切酶VIII**：可以识别并切除包括尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲在内的多种受损碱基。-**核酸内切酶III**：主要识别和切除氧化性损伤的嘌呤碱基，如8-氧鸟嘌呤。3.**裂解酶活性**：-**核酸内切酶VIII**：具有β和δ裂解酶活性，而**核酸内切酶III**具有β裂解酶活性。这些区别决定了它们在DNA损伤修复中的作用和应用范围。