除了毕赤酵母,还有几种常用的表达系统可以用来提高重组蛋白的表达量和纯度:1.大肠杆菌表达系统:大肠杆菌是常用的原核表达系统,具有遗传背景清晰、培养简单、成本低廉等优点,适合快速表达和生产目的蛋白。但是,它不能进行复杂的翻译后修饰。2.酿酒酵母表达系统:酿酒酵母是一种真核表达系统,具有蛋白质翻译后加工能力,适合于表达真核的蛋白,且培养和转化操作简便,适合大规模工业化生产。3.昆虫/杆状病毒表达系统:这种系统可以对真核的蛋白进行翻译后加工,适合于表达复杂糖蛋白,且具有较高的表达量和纯度。4.哺乳动物细胞表达系统:如HEK293细胞,能够进行与人类相似的翻译后修饰,适合表达需要复杂糖基化等修饰的蛋白,但成本相对较高。5.枯草杆菌表达系统:枯草杆菌具有蛋白分泌能力强、培养简单等优点,适合于工业规模生产。6.粟酒裂殖酵母:其生理特性接近高等生物,适合表达真核膜蛋白。每种表达系统都有其独特的优势和局限性,选择时需要考虑目标蛋白的特性、所需的翻译后修饰、成本、产量以及纯化路线等因素。通过优化表达载体设计、position:absolute;left:269px;top:94px;">在DNA合成过程中,100 mM dATP溶液能够快速参与反应,显著提高合成效率。提高数据产出效率。北京毕赤酵母表达病毒样颗粒技术服务开发
GoldenView II吖啶橙核酸染料:高效、安全的核酸检测选择GoldenView II吖啶橙核酸染料是一种新型的花青类核酸染料,可有效替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于核酸的检测和染色。它在琼脂糖凝胶电泳中表现出色,与核酸结合后能产生强烈的荧光信号,灵敏度比EB高出5-10倍。工作原理GoldenView II通过与核酸的特异性结合发出荧光。与双链DNA结合时,其荧光发射峰为530 nm,呈现绿色荧光;而与单链DNA或RNA结合时,发射峰为640 nm,呈现红色荧光。这种特性使其不仅能用于DNA的检测,还可用于RNA的染色。使用方法GoldenView II的使用方法与EB相似,但具有更高的灵敏度和安全性。在琼脂糖凝胶电泳中,将染料加入凝胶溶液中,冷却后倒胶并进行电泳。电泳结束后,可通过紫外透射仪或凝胶成像系统观察结果。优势与应用GoldenView II的主要优势在于其高灵敏度和低毒性。与EB相比,它在紫外光下的荧光强度更高,背景更清晰。此外,它还可用于细胞内DNA和RNA的染色,帮助研究细胞周期、凋亡和自噬等过程。GoldenView II广泛应用于分子生物学实验,如基因克隆、PCR产物分析和质粒提取等。它不仅适用于常规的琼脂糖凝胶电泳,还可用于荧光显微镜和流式细胞仪检测。浙江重组蛋白表达服务技术服务技术服务允许目标蛋白、具有不同亚基结构的多聚体蛋白的多个拷贝,或者表达目标蛋白及其同源结合伙伴。
DL2000 DNA Marker:分子生物学实验中的精细标尺在分子生物学实验中,DNA Marker是分析DNA片段大小的重要工具,而DL2000 DNA Marker凭借其精细的分子量范围和清晰的条带,成为了实验室中不可或缺的实验助手。DL2000 DNA Marker是一种即用型的DNA分子量标准,通常用于琼脂糖凝胶电泳。它包含6条不同长度的线状双链DNA片段,覆盖从100 bp到2000 bp的范围,具体条带包括100 bp、200 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp和2000 bp。其中,500 bp和1500 bp的条带亮度较高,便于快速定位和参考。这种设计使得DL2000在电泳过程中能够清晰地显示目标DNA片段的大小,帮助研究人员快速判断实验结果。DL2000 DNA Marker的使用非常便捷。它已经预混了Loading Buffer,可以直接取5-10 μL用于电泳,无需额外处理。这种即用型设计节省了实验时间,提高了实验效率。此外,DL2000的保存条件也非常灵活,可在-20℃长期保存,融化后可在4℃保存,避免反复冻融即可。在实验中,DL2000 DNA Marker的条带清晰、亮度均匀,即使在低浓度的琼脂糖凝胶中也能保持良好的分离效果。它适用于1%-3%的琼脂糖凝胶浓度,能够满足大多数常规实验的需求。
TthDNAPolymerase的高保真性能TthDNAPolymerase具有较高的保真度,在DNA合成过程中能准确地识别和配对碱基,减少错误掺入的发生。其独特的活性中心结构使其对底物具有高度选择性,降低了碱基错配的概率。在基因克隆、测序等对准确性要求极高的实验中,能够保证合成的DNA序列与模板高度一致,为后续的研究提供了可靠的基因材料,避免因碱基突变导致的实验结果偏差,保障了分子生物学研究的科学性和严谨性。TthDNAPolymerase的反应速度此酶的催化反应速度较快,能够在较短时间内完成DNA链的延伸。在PCR反应中,它可以快速地添加核苷酸到引物的3'-OH末端,使得目标DNA片段的扩增效率显著提高。例如在大规模的基因筛查实验中,快速的反应速度能够在短时间内获得大量的扩增产物,节省了实验时间,加快了研究进程,满足了现代分子生物学高通量、高效率的实验需求。Blood Direct PCR Master Mix 2×的优势在于其能够直接作用于血液样本,无需进行繁琐的DNA提取和纯化步骤。
甲基汞凝胶电泳缓冲液(10×):高效、稳定的核酸电泳缓冲液甲基汞凝胶电泳缓冲液(10×)是一种为核酸电泳设计的高效缓冲液,广应用于甲基氢氧化汞电泳实验中。该缓冲液的主要成分包括500 mM硼酸、50 mM硼酸钠和硫酸钠,pH值约为8.1。产品特点高效分离:甲基汞凝胶电泳缓冲液(10×)在稀释为1×工作液后,能够提供稳定的pH环境和离子强度,特别适合分离小片段核酸。稳定性高:该缓冲液以10倍浓缩的形式提供,储存和使用过程中更加稳定,适合长期保存。兼容性强:适用于多种类型的琼脂糖凝胶电泳,兼容常见的核酸染料(如EB或GoldView),满足不同实验需求。使用方法稀释缓冲液:使用时需将10×甲基汞凝胶电泳缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释至1×工作液。制备凝胶:将琼脂糖溶解于1×缓冲液中,加热熔化后冷却至55℃,加入甲基氢氧化汞,使其终浓度为5 mmol/L。电泳操作:将样品加入凝胶孔中,使用1×缓冲液进行电泳。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料对凝胶进行染色,并在紫外透射仪下观察结果。保存与注意事项保存条件:甲基汞凝胶电泳缓冲液(10×)应保存在室温下,避免长时间暴露在高温或强光下。使用期限:未开封的产品有效期为12个月。Hot-Start Taq DNA Polymerase的优势在于其热启动机制避免了因引物非特异性退火或引物二聚体的非特异性扩增。北京毕赤酵母表达病毒样颗粒技术服务开发
DL100 DNA Marker的使用也非常方便。推荐上样量为5-10 μL,适用于1%-3%的琼脂糖凝胶浓度。北京毕赤酵母表达病毒样颗粒技术服务开发
除了His标签和GST标签,还有多种融合伴侣技术可以用于提高蛋白的表达和纯度,包括但不限于以下几种:1.Flag标签:Flag是一个八肽序列(DYKDDDDK),可以通过抗Flag标签的抗体进行免疫沉淀或西方印迹分析,有助于提高蛋白的纯度。2.Fc融合蛋白:Fc标签是免疫球蛋白的恒定区,可以提高蛋白在哺乳动物细胞中的溶解性和稳定性,并且可以通过蛋白A亲和层析进行纯化。3.人血清白蛋白(HSA):HSA作为融合伴侣可以提高蛋白的溶解性和稳定性,延长半衰期,并通过其固有的结合特性进行纯化。4.转铁蛋白:转铁蛋白可以作为融合伴侣,利用其与铁的高亲和力进行纯化,并且有助于提高蛋白的稳定性。5.XTEN聚合物:XTEN是一种柔性的多肽聚合物,可以提高蛋白的溶解性和稳定性,有助于防止聚集。6.弹性蛋白样多肽(ELP):ELP具有可逆的热响应性质,可以通过温度诱导的相分离进行纯化,有助于提高纯度。7.Strep标签:Strep标签是一个短肽序列,可以通过Strep-Tactin亲和层析进行高效率的纯化。8.MBP融合蛋白:麦芽糖结合蛋白(MBP)可以作为融合伴侣,提高蛋白的溶解性,并通过亲和层析进行纯化。。北京毕赤酵母表达病毒样颗粒技术服务开发
DL15000 Plus DNA Marker:大片段DNA分析的理想工具DL15000 Plus DNA Marker 是一种即用型的DNA分子量标准,广应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于分析和估算DNA片段的大小。它由多条线状双链DNA片段组成,覆盖从250 bp到15,000 bp的范围,能够为大片段DNA的分析提供精确的参考。产品特点组成:DL15000 Plus 包含10条线状双链DNA片段,分别为250 bp、500 bp、1,000 bp、1,500 bp、2,500 bp、4,000 bp、5,000 bp、7,500 bp、10,000 bp和15,000 bp。即用型设计:已预混...