在实验室中使用Thioredoxin-NP-27肠激酶底物时,应遵循以下步骤:1.稀释底物:首先,使用反应缓冲液(ReactionBuffer)将Thioredoxin-NP-27稀释至0.1mg/ml。2.准备反应体系:取数个离心管,每个管中加入40μL稀释后的Thioredoxin-NP-27溶液。3.添加肠激酶:然后,根据实验设计,向每个离心管中加入不同量的肠激酶溶液,例如0μL、2μL、3μL等,以评估不同酶量对底物的切割效果。4.补充反应缓冲液:根据加入的肠激酶溶液量,相应减少反应缓冲液的量,以保持总体积不变。5.进行酶切反应:将离心管置于37℃±0.5℃水浴中,反应16小时。6.终止反应:反应结束后,向每个反应管中加入50μL的2×SDS凝胶加样缓冲液,以终止酶切反应。7.电泳分析:取出各反应液20μL,进行SDS-PAGE凝胶电泳,以观察酶切效果。8.计算肠激酶活性:根据GB/T41907-2022标准,按照提供的公式计算肠激酶活性,单位为肠激酶活性单位每毫克蛋白或固含物(U/mg)。9.保存条件:Thioredoxin-NP-27应在-30~-15℃保存,运输时温度应≤0℃。Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)通过其独特的酶体系和优化配方,为长片段PCR扩增提供便捷的解决方案。辽宁重组类人源胶原蛋白技术服务研发

Thioredoxin-NP-27是一种肠激酶的底物,用于检测肠激酶的活性。它是由硫氧还蛋白和NP-27融合而成,中间通过肠激酶的酶切位点(DDDDK)连接。这种底物在经过肠激酶酶切后,可以通过SDS-PAGE电泳观察到分子量分别为18kDa和27kDa的两条带。肠激酶是一种高度专一性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶,它在Lys的C端水解多肽。肠激酶可以将胰蛋白酶原转变为胰酶,也可以将带有这个识别序列的融合蛋白切开。在37℃,16小时内将0.5mg的反应底物Thioredoxin-NP-27切割为NP-27达95%所需的酶量定义为一个单位。肠激酶的活性单位定义为在37℃,16小时内将0.5毫克的Thioredoxin-NP-2795%降解为NP-27所需要的酶量。这种酶在基因工程产品开发中具有广泛的应用,特别是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂。Thioredoxin-NP-27产品的优势在于它符合GB/T41907-2022标准,适用于肠激酶活性检测的底物。产品保存条件为-30~-15℃,运输条件为≤0℃,以确保其稳定性和活性。使用时,应按照产品说明进行操作,并注意安全防护措施。黑龙江类人源胶原蛋白开发技术服务临床前研究在毕赤酵母表达系统中,表达载体由几个部分组成,包括启动子序列、转录终止序列和克隆位点的序列、。

除了毕赤酵母,还有几种常用的表达系统可以用来提高重组蛋白的表达量和纯度:1.大肠杆菌表达系统:大肠杆菌是常用的原核表达系统,具有遗传背景清晰、培养简单、成本低廉等优点,适合快速表达和生产目的蛋白。但是,它不能进行复杂的翻译后修饰。2.酿酒酵母表达系统:酿酒酵母是一种真核表达系统,具有蛋白质翻译后加工能力,适合于表达真核的蛋白,且培养和转化操作简便,适合大规模工业化生产。3.昆虫/杆状病毒表达系统:这种系统可以对真核的蛋白进行翻译后加工,适合于表达复杂糖蛋白,且具有较高的表达量和纯度。4.哺乳动物细胞表达系统:如HEK293细胞,能够进行与人类相似的翻译后修饰,适合表达需要复杂糖基化等修饰的蛋白,但成本相对较高。5.枯草杆菌表达系统:枯草杆菌具有蛋白分泌能力强、培养简单等优点,适合于工业规模生产。6.粟酒裂殖酵母:其生理特性接近高等生物,适合表达真核膜蛋白。每种表达系统都有其独特的优势和局限性,选择时需要考虑目标蛋白的特性、所需的翻译后修饰、成本、产量以及纯化路线等因素。通过优化表达载体设计、position:absolute;left:269px;top:94px;">
DNA Marker II:高效、精细的DNA分子量标准DNA Marker II 是一种广应用于琼脂糖凝胶电泳的即用型DNA分子量标准,用于快速估算DNA片段的大小。它由多条线状双链DNA片段组成,能够为DNA分析提供清晰、准确的分子量参考。产品特点组成:DNA Marker II 通常包含6-8条不同长度的DNA片段,覆盖从100 bp到2000 bp的范围。具体片段长度可能因品牌而异,但常见的片段包括100 bp、200 bp、500 bp、1000 bp和2000 bp。即用型设计:预混了1×Loading Buffer,无需额外添加,直接上样,节省时间和操作步骤。清晰的条带:电泳图像清晰,背景干净,条带亮度均匀,便于在紫外灯下观察。稳定性高:在室温下可稳定保存6个月,长期保存建议置于-20℃,避免反复冻融。使用方法上样量:建议每次取5 µL直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:推荐使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶,1×TAE或0.5×TBE缓冲液,电压5-10 V/cm。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,紫外灯下观察。注意事项保存条件:建议低温保存,避免反复冻融,以防止核酸酶污染导致条带降解。琼脂糖质量:电泳时应尽量选用高质量的琼脂糖,以获得比较好分离效果。基因编辑技术被用来研究大肠杆菌中葡萄糖代谢通路的调控机制。

DL15000 DNA Marker:大片段DNA分析的理想工具DL15000 DNA Marker 是一种即用型的DNA分子量标准,广应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于分析和估算DNA片段的大小。它由7条线状双链DNA片段组成,覆盖从250 bp到15000 bp的范围,能够为大片段DNA的分析提供精确的参考。产品特点组成:DL15000 DNA Marker 包含7条DNA片段,分别为250 bp、1000 bp、2500 bp、5000 bp、7500 bp、10000 bp和15000 bp。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接上样,无需额外处理。清晰的条带:电泳图像清晰,背景干净,条带亮度均匀。稳定性高:在-20℃下可长期保存,室温下也能稳定保存6个月。使用方法上样量:建议每次取5 µL直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:推荐使用1%的琼脂糖凝胶,电压5 V/cm左右,电泳时间35-40分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察。注意事项保存条件:建议低温保存,避免反复冻融。琼脂糖质量:电泳时应尽量选用高质量的琼脂糖,以获得比较好分离效果。电泳缓冲液:及时更换电泳缓冲液并使用新制备的凝胶,以免影响电泳结果。。其稳定的性能和清晰的条带,使得实验结果更加可靠,更好地提高了实验效率。安徽汉逊酵母表达技术服务临床前研究
DL2000的保存条件也非常灵活,可在-20℃长期保存,融化后可在4℃保存,避免反复冻融即可。辽宁重组类人源胶原蛋白技术服务研发
DNA Marker VI:高效、精细的DNA分子量标准DNA Marker VI 是一种即用型的DNA分子量标准,广应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于快速估算DNA片段的大小。它由6条线状双链DNA片段组成,覆盖从250 bp到10,000 bp的范围,能够为DNA分析提供清晰、准确的分子量参考。产品特点组成:包含6条DNA片段,大小分别为250 bp、1000 bp、2500 bp、5000 bp、7000 bp和10000 bp。其中2500 bp条带浓度较高,显示为加亮带。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接上样,无需额外处理。清晰的条带:电泳图像清晰,背景干净,条带亮度均匀。稳定性高:在-20℃下可长期保存,短期频繁使用可置于4℃保存。使用方法上样量:根据加样孔的大小,每次取2-5 µL直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中。电泳条件:推荐使用1.0%的琼脂糖凝胶,电压4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察。注意事项保存条件:建议低温保存,避免反复冻融。琼脂糖质量:电泳时应尽量选用高质量的琼脂糖,以获得比较好分离效果。电泳缓冲液:及时更换电泳缓冲液并使用新制备的凝胶,以免影响电泳结果。辽宁重组类人源胶原蛋白技术服务研发
PhusionDNAPolymerase是一种高保真聚合酶,广泛应用于分子生物学实验中,以下是一些实验操作中的注意事项:1.反应体系配置:在50μL的反应体系中,建议使用1.5μL的5×PCREnhancer(如果需要)和0.5μL的PhusionDNAPolymerase,并补足超纯水至50μL。如果反应体积不同,各组分需按比例调整。2.缓冲液选择:对于GC含量较高的模板或具有复杂二级结构的序列,建议使用5×PhusionGCBuffer代替5×PhusionHFBuffer进行PCR反应。3.酶的添加:PhusionDNAPolymerase加入反应体系中,以避免其3-5外切酶活性降解引物...