在基因工程的微观世界中,限制性核酸内切酶是科学家们手中的重要工具,而ApaLI便是其中一位“精细刻刀”。它以其独特的识别序列和精细的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物学研究中发挥着关键作用。ApaLI的识别序列是“G^TGCAC”,这一序列在DNA中相对罕见,使得ApaLI能够在特定位置进行切割。它会在“^”标记的位置将DNA链切断,产生黏性末端。这种黏性末端的特性使得ApaLI在基因克隆和重组DNA构建中具有独特的优势。在基因工程中,ApaLI的应用极为广。科学家可以利用它将目标基因从复杂的基因组中精细地分离出来,再通过DNA连接酶将切割后的基因片段与载体DNA连接起来,构建出能够高效表达目标蛋白的重组载体。这一过程不仅需要精细的切割,还需要切割后的片段能够完美匹配,而ApaLI的黏性末端特性正好满足了这一需求。ApaLI的另一个重要应用是基因分析。通过观察ApaLI对不同DNA样本的切割模式,科学家可以分析基因的多态性,进而推断出基因的结构和功能差异。这种技术在遗传病诊断和基因多样性研究中具有重要意义。例如,在某些遗传病的研究中,ApaLI可以用来检测基因突变,帮助科学家更好地理解疾病的遗传机制。Cas9 NLS与CRISPR/Cas9系统中的gRNA兼容,可以进行位点特异性的DNA切割 。BbsI内切酶

重组人TNFSF15蛋白(HisTag)是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。TNFSF15(TumorNecrosisFactorSuperfamilyMember15),也称为VEGI(VascularEndothelialGrowthInhibitor),是TNF超家族的重要成员,广参与免疫调节、炎症反应和血管生成的调控。它在多种生物学过程中发挥关键作用,尤其是在免疫细胞的启动和组织修复过程中。TNFSF15的功能与机制TNFSF15通过其胞外区与受体(如TNFRSF25)结合,启动下游的信号通路。TNFSF15的信号转导依赖于其受体的胞内段结构域,能够启动NF-κB、MAPK和JNK等信号通路,进而调节细胞的存活、增殖和炎症反应。在免疫系统中,TNFSF15通过启动免疫细胞(如T细胞和树突状细胞),促进免疫反应。此外,TNFSF15在血管生成中也发挥重要作用,通过抑制血管内皮细胞的增殖和迁移,调节血管的形成。TNFSF15的功能异常与多种疾病相关,如自身免疫性疾病、炎症性疾病和瘤。重组人TNFSF15蛋白(HisTag)的特点重组人TNFSF15蛋白(HisTag)具有以下明显特点:高纯度:纯度≥95%(经SDS-PAGE和SEC-HPLC验证),确保实验结果的可靠性。低内素:内素水平<0.1EU/μg,适合用于细胞实验和体内研究。两步法sgRNA合成试剂盒Probe qPCR Mix (2×)通常含有热启动DNA聚合酶,这种聚合酶在高温下激发,可以减少非特异性扩增 。

定点突变R119A破坏了Siglec-10与唾液酸配体的关键盐桥,使该蛋白丧失天然结合活性,却保留完整IgV结构域与抗体识别表位。融合His-Avi双标签后,既可通过Ni-NTA实现一步纯化,又能在体外被BirA酶单点生物素化,生成均一、定向固定的表面探针。哺乳动物表达系统保证真糖基化,>98%纯度(SEC-HPLC),内素<0.05 EU/μg,适用于流式、SPR、ELISA等反向验证实验:将其包被于链霉亲和素芯片,可直接区分抗体或候选药物的配体阻断能力;与野生型共孵育,可定量测定小分子或糖聚合物对Siglec-10的抑制常数。每批次附配体缺失验证报告,4℃稳定两周,-80℃长期保存,是研究肿瘤免疫逃逸、神经炎症及CAR-T安全开关的必备阴性对照。
重组人STAT4蛋白(His Tag)是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。STAT4(Signal Transducer and Activator of Transcription 4)是一种重要的转录因子,广参与免疫细胞的信号转导和基因表达调控,在免疫反应和炎症过程中发挥关键作用。STAT4的功能与机制STAT4是JAK-STAT信号通路的关键成员,主要在T细胞、巨噬细胞和树突状细胞中表达。它通过与细胞因子受体(如IL-12R和IL-23R)结合的JAK激酶相互作用,被磷酸化启动后进入细胞核,调控多种免疫相关基因的表达。STAT4在Th1细胞分化、巨噬细胞活化和炎症反应中起重要作用,其功能异常与自身免疫疾病(如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎)和慢性炎症密切相关。重组人STAT4蛋白(His Tag)的特点重组人STAT4蛋白(His Tag)具有以下明显特点:高纯度:纯度≥95%(经SDS-PAGE和SEC-HPLC验证),确保实验结果的可靠性。低内素:内素水平<0.1 EU/μg,适合用于细胞实验和体内研究。功能完整:保留了天然STAT4的磷酸化位点和转录启动功能。实验应用重组人STAT4蛋白(His Tag)在多种实验中表现出色:流式细胞术:检测STAT4在免疫细胞中的表达水平。

在基因工程的微观世界中,限制性核酸内切酶是科学家们不可或缺的工具,而AvaII便是其中一位“关键刻刀”。它以其独特的识别序列和精细的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物学研究中发挥着重要作用。AvaII的识别序列是“G^GWCC”,其中“W”突出腺嘌呤(A)或胸腺嘧啶(T)。这种序列的识别特性使得AvaII能够在特定位置进行切割,产生黏性末端。这种黏性末端的特性使得AvaII在基因克隆和重组DNA构建中具有独特的优势。在基因工程中,AvaII的应用极为广。科学家可以利用它将目标基因从复杂的基因组中精细地分离出来,再通过DNA连接酶将切割后的基因片段与载体DNA连接起来,构建出能够高效表达目标蛋白的重组载体。这种精细的切割能力使得AvaII成为处理复杂基因组时的理想选择。AvaII的另一个重要应用是基因分析。通过观察AvaII对不同DNA样本的切割模式,科学家可以分析基因的多态性,进而推断出基因的结构和功能差异。这种技术在遗传病诊断和基因多样性研究中具有重要意义。例如,在某些遗传病的研究中,AvaII可以用来检测基因突变,帮助科学家更好地理解疾病的遗传机制。AvaII的发现和应用是分子生物学领域的一大进步。FnCas12a的双链或单链DNA靶标都能激发其反式剪切活性,即在形成三元复合物后,针对非特异序列ssDNA的剪切。HA (126-138)
在gRNA的引导下,Cas9 NLS可以对特定DNA序列进行剪切,适用于研究基因功能或进行基因编辑 。BbsI内切酶
重组人LAP(TGF-β1)蛋白(Recombinant Human LAP (TGF beta 1) Protein, His Tag)是转化生长因子-β1(TGF-β1)前体蛋白的潜伏相关肽(Latency-Associated Peptide)部分,是TGF-β1成熟过程中的关键调节因子。TGF-β1是一种多功能细胞因子,广参与细胞增殖、分化、迁移、免疫调节及组织修复等生理过程。LAP通过与成熟TGF-β1非共价结合,维持其非活性状态,防止TGF-β1过早启动。该重组LAP蛋白采用真核表达系统(如HEK293细胞)制备,确保了其天然构象和生物活性。其N端融合了His标签,便于通过Ni-NTA亲和层析进行高效纯化,获得高纯度、高稳定性的蛋白产物。这种设计不仅提高了蛋白的溶解性和稳定性,也方便了后续的实验操作,如ELISA、Western blot、免疫沉淀及蛋白相互作用研究等。研究表明,LAP在调控TGF-β1启动、维持免疫稳态及促进组织修复中具有重要作用。其表达异常与多种疾病密切相关,如肺纤维化、肝硬化及自身免疫病。因此,重组人LAP蛋白不仅是研究TGF-β1启动机制的重要工具,也为开发相关疾病的治策略提供了有力支持,具有重要的科研和临床应用价值。BbsI内切酶
重组人SOST蛋白是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。SOST(Sclerostin)是一种分泌性蛋白,主要由骨细胞和成骨细胞分泌,广参与骨骼发育和骨代谢的调控。SOST通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,调节骨形成和骨吸收的平衡,在维持骨骼健康中发挥重要作用。SOST的功能与机制SOST是Wnt/β-catenin信号通路的负调节因子,通过与LRP5/6受体结合,阻止Wnt配体启动该信号通路,从而抑制成骨细胞的分化和骨形成。此外,SOST还通过调节破骨细胞的活性,影响骨吸收过程。在骨骼发育过程中,SOST的表达水平对骨骼的强度和密度至关重要。SOS...