下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因***DH进行荧光PCR扩增，方法如下：将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀；然后再加入200μL核酸释放剂，涡旋1min至沉淀完全散开，5000g离心30s，弃上清；向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的血液基因组DNA；取上清液3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。步骤①：50℃，2min，循环1次。步骤②：95℃，5min，循环1次。步骤③：95℃15s，55℃30s（收集荧光），循环40次。结果分析：平行扩增的荧光定量PCR反应中，阴性对照无扩增，说明反应体系正常，无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本，然后用人管家基因***DH引物进行荧光PCR扩增检测，结果如图1所示。 口腔拭子是海绵口腔拭子。泡沫口腔拭子供应商
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工艺说明：一次性医用耗材呼吸道***采样拭子试剂这种垂直固定方法源于植绒工艺，即把拭子置于静电场中，将纤维喷涂于拭子前列。这种工艺能实现具有开放式结构，且吸水性超高的薄层。不同于以往类似褥垫或软垫的传统缠绕拭子，尼龙植绒拭子没有会分散和圈闭样本的内部吸附核，而是使样本紧贴表面，从而能够快速完全地洗脱。产品描述：植绒拭子是由尼龙短纤维绒毛头和医用级ABS塑料杆构成。尼龙短纤维的作用就像一把柔软的刷子，能有效改善对细胞材料的采集；纤维间的毛细管运动形成强大的液压，由此摄取液体样本；同时样本紧贴拭子表面，易于洗脱。产品用途：采样尼龙植绒拭子用途***，在用于细菌学样本处理、***学细胞培养、DFA检验、快速直接的检验、酶免疫法检测、聚合酶链反应和基于分子诊断的检测，以及法医鉴定时都十分理想。也可用于流感、猪流感、禽流感、手足口等呼吸道***的咽喉部采样。产品特点：1.采用**的尼龙植绒技术，样本吸收更加快速2.新颖的折点设计，让拭子轻松折断并进入管中，更加便于操作3.限度的样本洗脱及转移，对微量DNA样本采集尤为出色4.经过***剂的特殊处理，防止微生物污染，封闭式包装，无菌、无酶、无***剂。口腔拭子的采样头端的凹陷处折断力大小应该不小于2N。
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本发明的特征在于：应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测，主要步骤如下。（1）将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀。（2）将步骤（1）中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，至沉淀完全散开，然后5000g离心30s，弃上清。（口腔拭子样本则无需进行此步骤）。（3）向步骤（2）所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1～2min；室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的基因组DNA；所述的核酸释放剂组成为20mM～80mM的氢氧化钠溶液、～、～、～、～***钠、～3%甲酰胺；所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2～图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。泡沫口腔拭子供应商
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