具体步骤如下:1,提**0分钟先用清水漱口(不用牙膏,尤其是母乳的婴儿需要喝几口清水,也不用漱口水);2、在信封上用笔作好标记(比如:父亲、母亲或孩子)和采集日期,姓名.3、一手持华晨阳基因采样棉签,伸进口腔左(右)内侧颊粘膜处稍用力反复擦拭15-20下(边擦拭边转动基因采样棉签),取出基因采样棉签,放在信封或者白纸上、阴干十多分钟待口水完全干掉;(擦拭的具**置是腮边或者说脸颊腮帮子内部——打个比方,大人捏孩子脸蛋的那个位置,从口腔里擦拭)4、同样的方法采集第二根棉签(另一侧),每个人一侧各提取三根(共六根)基因采样棉签;5、阴干后的基因采样采集棉签分别装入已做好标记的信封中密封(请不要用胶袋或者保鲜膜装采样棉签)。6,将取好的样本尽早拿到实验室做PCR实验,您也可以选择邮寄到实验室或者医院7,我公司接收样本、签定DNA委托申请表(代合同)、付款事宜、10个工作日出结果。取好的基因采样拭子棉签样本请不要自行保管超过一个星期,尽早快递到我们实验室以确保样本不受污染。特殊样本的取样操作方法请咨询客服(比如在对方不知情的情况下或者取孩子样本需要高度保密的情况)。一个合格的口腔拭子他应该是很洁净、没有臭味的,摸上去应该是柔软的,不能有黄斑、污迹或者是异物的。性能优良口腔拭子排名靠前

所有反应孔背景信号好、Ct值都在19~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型,说明本发明实例1提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法具有较好的可行性。将四份不同来源不同的人血液样本进行荧光PCR扩增检测,每份样本平行三次,结果分别如图2、图3、图4、图5所示,由图可见,每个样本的平行实验,其曲线的Ct值很接近且≤25。说明本发明实例提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法有可靠的重复性以及较好的均一性。实施例2与市场现有的血液基因组提取试剂盒产品对比。本发明的具体步骤如下:将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸释放剂(20mM~80mM的氢氧化钠溶液、~、~、~、~***钠、~3%甲酰胺),涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀;然后再加入200μL核酸释放剂,涡旋1min至沉淀完全散开,5000g离心30s,弃上清;向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的血液基因组DNA;取上清液3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。选用某公司的血液基因组提取试剂盒作为方法比对,具体操作过程:将取血管颠倒混匀数次,吸取200μL血液于。山东口腔拭子共同合作这款口腔拭子还针对不同的标本类型选用了不同的培养基(细菌、BINGDU、支原体、衣原体)。

同样唾液和口腔拭子中核酸提取方法与血液的提取方法相似包括以下4个过程:1.通过裂解液裂解口腔脱落细胞,释放核酸物质。2.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质,去除其他杂质。3.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。4.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。传统的提取方法由于核酸提取纯化过程耗时长,成本较高,步骤繁多,增加了基因污染的风险。因此需要一种血液、唾液和口腔拭子样本经过简单处理就可以作为模板进行荧光PCR扩增检测方法,满足科研和医学领域快速检测的要求。技术实现要素:本发明提供了一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。该发明通过快速简单处理口腔拭子和血液样本,且无需纯化可直接用于荧光PCR扩增的DNA。10分钟内即可得到应用于ARMS-PCR反应体系的模板DNA。同时优化ARMS-PCR荧光体系,在反应液中加入防污染UDG酶以及提高Taq酶稳定性的的BSA,从而实现血液和口腔拭子基因组快速荧光PCR扩增检测。该方法快速简单,成本低廉,检测灵敏,且用该方法提取的基因组与商品化试剂盒提取的基因组的检测结果相近。
本发明的特征在于:应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测,主要步骤如下。(1)将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至,加入200μL的核酸释放剂,涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀。(2)将步骤(1)中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,至沉淀完全散开,然后5000g离心30s,弃上清。(口腔拭子样本则无需进行此步骤)。(3)向步骤(2)所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1~2min;室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的基因组DNA;所述的核酸释放剂组成为20mM~80mM的氢氧化钠溶液、~、~、~、~***钠、~3%甲酰胺;所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2~图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。.兼容性超广:能与市面上大多数荧光检测仪兼容,并提供能替代进口品牌的检测棒,无需调整现有的限值。

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口腔细胞采样时要撕开口腔拭子外包装,小心取出口腔拭子(注意:整个取样过程中手不能接触拭子部分)。性能优良口腔拭子排名靠前
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