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HE染色基本参数
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HE染色企业商机

HE染色主要是为通细胞及胞核形态、大小来区别各种细胞的,并不是直接通过颜色来区分的,HE染色细胞坏死的三种改变:(1)细胞核的改变:这是细胞坏死的主要形态标志,表现为核浓缩,核碎裂,核溶解。(2)细胞质的改变:由于胞质发生凝固或溶解,HE染色呈深红色颗粒状,如肝细胞坏死出现的嗜酸性小体医学|教育网搜集整理。(3)间质的改变:由于各种溶解酶的作用,基质崩解、胶原纤维肿胀、断裂或液化,与坏死的细胞融合成一片,呈红染的颗粒状无结构物质。南京英瀚斯生物科研常备实验操作之HE染色。云南比较好的HE染色检测

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HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。去氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中称蓝色,所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝,如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。云南比较好的HE染色检测HE染色是常见的病理染色,是比较基础是病理染色之一。

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HE染色全名苏木精—伊红染色法,属于化学染色法,其主要依靠苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。实验过程:1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。2、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。3、伊红染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脱水各5min,入伊红染液中染色5min。4、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I5min-无水乙醇II5min-无水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。5、显微镜镜检,图像采集分析。结果判读:细胞核呈蓝色,细胞质呈红色

HE染色实验步骤:(1)样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS洗涤3次。(2)样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。(3)染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。(4)分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。(5)染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。(6)吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可骨组织HE染色的操作流程。

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HE染色知识点1:对送检组织标本的要求送检组织标本在手术切除或活检后应当立即放入4%中性缓冲甲醛溶液中固定。尸检标本应当尽量在死亡后尽早取材固定。送检组织需要全部取材的,应当在送检单上注明,有特殊要求(如细菌培养、解释道化学分析等)应当事先联系,并且在标本未固定前进行处理。知识点2:组织取材要求在对送检组织标本进行详细检查的基础上,根据诊断的需要,确定取材的部位和块数。切取的组织应当按照不同的部位分别给予不同的编号或标记,以便镜检时核对。另外,尽可能在取材前对有意义的标本的表面及剖面镜下摄影,并编号存档南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。常用HE染色试剂配制方法。湖北专业的HE染色服务

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HE染色观察细胞凋亡,凋亡检测中形态学方法是**直观、可靠的方法之一。对组织和各种细胞进行染色后,在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下观察,通过观察细胞的形态或染色的类型来判断凋亡的发生与否。细胞涂片或细胞甩片的制备:对于贴壁细胞,可将盖玻片放于培养器皿中,让培养细胞长于玻片上,然后用药物诱导细胞凋亡后取出,用4%多聚甲醛固定5min。对于悬浮细胞,用药物诱导细胞凋亡后,离心1000r/min收集细胞,用PBS洗2次,收集调整细胞数为1X105/ml,涂片或用离心甩片,用4%多聚甲醛固定5min;在光学显微镜下,贴壁细胞由原来的梭形或多角形变小、变圆,核呈蓝色或蓝黑色,胞浆呈淡红色,核固缩、破碎,形成凋亡小体等。悬浮细胞,整个细胞皱缩,核固缩,破碎,形成凋亡小体,染色质颜色加深等。云南比较好的HE染色检测

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