Tris-HCL与HEPES（供注射用）缓冲液应用对比
**常用的缓冲液有很多，如磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液、氨基酸缓冲液等。不同的缓冲液差别液很大，***主要来对比两种**常用的缓冲液：Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液各自的应用对比。
1、Tris-HCl缓冲液的应用Tris常用于蛋白或者核酸的缓冲液，其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的pH，由于其具有弱碱性，水溶液的pH在10.5左右，可通过添加HCl或者NaOH制备不同pH的缓冲液，根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效范围通常是pH7.0-9.2之间。此外，Tris还可以制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物（磷霉素等）的中间物，在化妆品、医药、涂料以及合成中均有应用。应用于体内时，Tris作为一种不含钠的氨基缓冲碱，在体液中与H2CO3结合，生成碳酸氢盐。因此它能缓冲酸，而且能降低CO2张力，有纠正急性呼吸性酸中毒和代谢性酸中毒双重效果，其作用较碳酸氢钠快而强。HEPES缓冲液对细胞无毒性作用，它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用时浓度为10-50mmol/L，一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。在体外诊断、DNA/RNA提取、脂质体药物等方面均有应用。
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使用注射级氨丁三醇缓冲剂的注意事项：1.Tris缓冲液的pH值受温度影响大，△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃时缓冲液的pH＝8.4，则37℃时的pH＝7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃～4℃。2.Tris缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.13.Tris在一定程度上与各种分子反应，包括RNA酶抑制剂，醛，酶，DNA以及常见金属如Cr3+，Fe3+，Ni2+，Co2+和Cu2+等，在有些系统中会起抑制作用，在配制过程中需考虑与其他组分之间的相互作用；4.Tris缓冲液易吸收空气中的CO2，配制的缓冲液要注意盖严密封；5.Tris缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，需使用与注射级氨丁三醇溶液具有兼容性的电极；6.Tris缓冲液不适用于二喹啉甲酸（BCA）测定；7.吸入，摄入，皮肤吸收注射级氨丁三醇可造成伤害，操作时需戴好手套和护目镜；8.作为蛋白缓冲液时，若后续工作需要质谱，则不适宜用注射级氨丁三醇，比较好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。河北辅料HEPES大批量采购国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A集中采购。
HEPES，全称为4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸，又名N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸或N-2-Hydroxyethylpiperazine-N-2-Ethane Sulfonic Acid，是一种在生物化学和分子生物学领域中广泛应用的化学物质。以下是对HEPES的详细介绍：一、基本信息分子式：C8H18N2O4S分子量：238.31CAS号：7365-45-9外观：白色结晶粉末二、特性与功能两性离子特性：HEPES是一种两性离子缓冲剂，能够在不同pH条件下平衡氢离子浓度，从而维持溶液pH的稳定。***的有效缓冲范围：HEPES的有效缓冲范围在pH6.88.2之间，覆盖了大多数细胞生长所需的pH环境（pH7.27.4）。CO2无关性：与许多其他缓冲液不同，HEPES的缓冲能力不受CO2浓度的影响，适用于在开放环境中长时间培养细胞。低毒性：在适当浓度下，HEPES对细胞无毒性作用，能够为细胞提供一个安全的生长环境。
缓冲溶液在酸碱度环境、组成、缓冲原理和应用领域上存在一定差异。酸碱度环境差异：硼酸盐缓冲溶液和Tris-HCl缓冲溶液适用于碱性环境。磷酸盐缓冲溶液和HEPES缓冲溶液适用于弱酸性、弱碱性或接近中性的环境。缓冲溶液组成差异：硼酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液和磷酸盐缓冲溶液通常由两种物质配置而成。HEPES缓冲溶液则由一种物质配制。缓冲原理差异：硼酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液和磷酸盐缓冲溶液通过调节体系中缓冲对的电离或水解平衡移动来发挥缓冲作用。HEPES缓冲溶液通过平衡转化关系来发挥缓冲作用。应用领域差异：磷酸盐缓冲溶液在固体药物释放研究中应用较**。硼酸盐缓冲溶液多用于液体药物如滴眼液中。Tris-HCl缓冲溶液主要用于蛋白质、DNA等生物大分子的溶液体系中。HEPES缓冲溶液更多地应用于脂质体、细胞水平的相关生化实验研究中。这些缓冲溶液各自具有特定的优势和适用范围，研究人员可以根据实验需求选择*适合的缓冲体系注射用HEPESCDE已登记；
羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）是一种不能轻易穿过生物膜的缓冲。 它适用于伊立替康脂质体，因为它可以在稳定脂质体外水相酸碱度为弱碱性的情况下，不改变内水相酸性酸碱度。HEPES 的用量应该在10-25mM 之间，10mM以下的用量会导致缓冲能力较弱， 25mM以上可能对一些细胞造成不良反应。HEPES的使用以及操作应尽量在避光的情况下进行。这是因为在灯光下，HEPES会产生H2O2，而H2O2对活性的物体来说是有害的，这对培养的细胞会造成一定的伤害。
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HEPES是一种两性离子缓冲剂，化学式为C8H18N2O4S，分子量238.3g/mol。其pKa值为7.5（25℃），在pH6.8-8.2范围内具有优异的缓冲能力。作为Good's缓冲液家族成员，HEPES对细胞无毒性，且不与金属离子螯合，适合含金属离子的实验体系。其水溶性（>1M）和低渗透压特性使其成为细胞培养的理想选择。HEPES在细胞培养中的应用HEPES***用于哺乳动物细胞培养，尤其在CO2培养箱外操作时（如显微镜观察），可替代碳酸氢盐缓冲系统。推荐浓度为10-25 mM，过高浓度可能抑制细胞生长。需注意HEPES对光敏感，需避光保存。辽宁羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES生产厂家
