随着分子生物学的发展，免疫组织化学（Immunohistochemistry, IHC）染色已成为现代病理诊断的“第三支柱”，实现了从单纯的形态观察向分子标志物检测的跨越。IHC基于抗原抗体特异性结合的原理，利用标记的特异性抗体去识别组织切片上的目标抗原（如特定的蛋白质或多肽），并通过显色反应系统将其可视化。这使得病理医生能够确定细胞的起源（例如上皮、间叶、淋巴源性）、分化方向、功能状态以及分子亚型。在**病理学中，IHC的作用尤其突出：它不仅用于确定低分化或转移性**的原发灶，还能进行**的精细分型（如淋巴瘤的分型），并提供关键的预后和***指导信息（如乳腺*的ER、PR、HER2受体状态检测，和肺*、黑色素瘤中的PD-L1表达）。IHC极大地提高了病理诊断的特异性和灵敏度，是实现个体化医疗和精细医学不可或缺的技术支撑。PAS染色用于检测糖原。江苏Tunel染色外包
尽管病理染色技术已非常成熟，但在实际应用中仍面临一些挑战，并有巨大的发展空间。挑战包括：组织处理流程的变异性（如脱钙、固定对染色的影响）、IHC抗体的一致性和标准化、以及在数字化环境中如何更好地管理和分析海量的染色图像数据。未来的发展趋势将聚焦于提高染色的效率、特异性和自动化水平。例如，多重荧光免疫组化（Multiplex IHC/IF）技术允许在同一张切片上同时标记并分析多达5-8个甚至更多的生物标志物，这对于**微环境的复杂研究和PD-L1等多个免疫检查点蛋白的共表达分析至关重要。此外，质谱流式细胞技术与组织切片分析的结合，以及利用深度学习算法对染色切片进行自动诊断和量化分析，将进一步推动病理染色技术向更高通量、更精确、更智能化的方向发展，**终实现对疾病更深层次的理解和更个性化的***。南京免疫荧光染色结果分析PAS染色用于检测糖原和其他多糖物质。
鲁士蓝染色（Prussian Blue Staining）是一种常用的组织化学染色方法，主要用于检测和定位组织中的铁沉积。这种染色方法能够将三价铁离子（Fe³⁺）还原为二价铁离子（Fe²⁺），并与亚铁**钾反应生成不溶性的蓝色沉淀物——普鲁士蓝（Prussian Blue）。这种方法在病理学、血液学和神经科学等领域有广泛应用。鲁士蓝染色的基本原理1. 铁离子的还原：•在酸性条件下，三价铁离子（Fe³⁺）被还原成二价铁离子（Fe²⁺）。2. 与亚铁**钾反应：•二价铁离子（Fe²⁺）与亚铁**钾（K₄[Fe(CN)₆]）反应，生成不溶性的普鲁士蓝沉淀物。•反应方程式：[ \text{Fe}^{2+} + K_4[\text{Fe(CN)}_6] \rightarrow \text{Fe}_4[\text{Fe(CN)}_6]_3 + 4K^+ ]
选择合适的染色方法取决于实验的具体目的和需要检测的组织或细胞成分。以下是一些常见的实验目的及其相应的染色方法：1.观察组织结构和细胞形态：•H&E染色（苏木精-伊红染色）：适用于常规组织学和病理学检查，能够清晰区分细胞核和细胞质，显示组织结构和病变。2.检测结缔组织和纤维化：•Masson三色染色：用于区分肌肉、胶原纤维和细胞质，适合研究结缔组织和纤维化病变。3.检测糖原和多糖类物质：•PAS染色（过碘酸-Schiff反应）：用于检测糖原、***和其他多糖类物质，常用于诊断糖原贮积病和******。染色切片在医学研究中具有重要作用。
普鲁士蓝的应用领域1. 铁代谢相关疾病：•在肝脏、脾脏、骨髓等***中，鲁士蓝染色用于检测铁沉积，帮助诊断和评估铁过载疾病，如血色素沉着症（Hemochromatosis）和继发性铁过载。2. 脑组织中的铁沉积：•在神经退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病）的研究中，鲁士蓝染色用于检测脑组织中的铁沉积，这些沉积可能与疾病的进展有关。3. **研究：•在某些类型的**中，铁代谢异常可能导致铁沉积，鲁士蓝染色可以用于检测这些异常。染色步骤1. 样品准备：•将组织切片固定在载玻片上，通常使用福尔马林或其他固定剂。•用蒸馏水或PBS缓冲液清洗切片。2. 还原反应：•将切片浸入含有盐酸（HCl）和亚硫酸钠（Na₂S₂O₃）的溶液中，在室温下孵育一定时间（通常是10-20分钟），以还原三价铁离子。Giemsa染色广泛应用于血液涂片和骨髓涂片。ATP染色公司
Verhoeff-Van Gieson染色用于显示弹性纤维和胶原纤维。江苏Tunel染色外包
在脑卒中模型中用到的染色方法：•在脑卒中（如中风）的研究中，TTC染色同样用于区分正常的脑组织和缺血性损伤区域。正常的脑组织会被染成红色，而缺血区域则保持无色。•通过这种方法，研究人员可以直观地观察到脑组织中的缺血**和半影区，并进行定量分析。染色步骤1. 准备样品：•将动物安乐死后，迅速取出心脏或脑组织，并切成一定厚度的切片（通常为2mm厚）。2. 染色：•将切片放入预先配制好的TTC溶液中（通常是1%~2%的TTC溶解在生理盐水中）。•将切片置于37°C恒温水浴中孵育一段时间（通常为15-30分钟）。3. 固定：•染色完成后，将切片转移到4%多聚甲醛或其他固定液中进行固定，以防止组织自溶和保存染色结果。4. 拍照和分析：•固定后的切片可以用相机拍照记录，然后使用图像分析软件测量梗死区域和总组织面积，计算梗死面积占总组织面积的百分比。优点•操作简便：江苏Tunel染色外包
