本发明涉及一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。背景技术:近年来,随着荧光PCR技术的不断成熟。该技术在科研及检验领域得到了***的应用,成为分子生物学领域不可或缺的一项重要技术。在进行遗传背景分析过程中,血液、唾液和口腔拭子成为重要的生物分析样本。但是,由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反应***物,例如血液中含有血红素,蛋白质,脂肪,抗凝剂等,唾液和口腔拭子含有蛋白质,脂肪,抗凝剂等,使得用血液、唾液和口腔拭子直接进行荧光PCR反应变得尤为困难。因此,现在临床上往往先要从血液、唾液和口腔拭子样本中纯化出DNA,才能进行样本的DNA扩增。提取血液、唾液和口腔拭子基因组的方法种类非常多,传统酚氯仿抽提法,高盐盐析法,***模离心柱吸附法,磁珠法,等等。经典的血液核酸提取方法包括几个过程。1.通过低渗液涨破红细胞,将血红素物质释放出来,然后离心,清洗去除血红素。2.通过裂解液裂解白细胞,释放核酸物质。3.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质,去除其他杂质。4.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。5.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。口腔拭子没有标本残量,可以加快标本过程处理。天津口腔拭子信誉保证

1根微细型鼻咽植绒拭子50支/盒6盒/箱货号产品名称规格902CSRK涂抹棒取样盒(配有1个SRK稀释液10ml的自立管、1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子)25支/盒902C2SRK涂抹棒取样盒(配有1个SRK稀释液10ml的自立管、1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子)250支/箱905CSRK涂抹棒取样盒(配有培养基自立管、涂抹棒粘胶纤维拭子、取样模具10*10cm各1个)10套/盒908CSRK涂抹棒取样盒(配有1个SRK稀释液、1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子)25支/盒167KS01塑料单独包装(1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子)1000支/箱155C管装单独包装(1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子)1000支/箱922CSRK取样运送管(配有10ml稀释液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子,独立包装于无菌袋里)1支/包926CSRK取样运送管(配有10ml稀释液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子)50支/盒929CSRK取样试剂盒(配有letheen肉汤培养基、适用于petrifilm纸片平板计数)50支/盒947CSRK取样运送管(配有4ml通用中和液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子)50支/盒947C2SRK取样运送管(配有4ml通用中和液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子)300支/箱938CSRK471取样盒(每小袋配有10ml稀释液、8个管装塑料涂抹棒聚酯纤维拭子)25支/盒954CSRKPHARMA,塑料涂抹棒。广东口腔拭子欢迎咨询口腔拭子采样时要让拭子头部和口腔黏膜充分接触,然后重复一分钟。

下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因***DH进行荧光PCR扩增,方法如下:将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸释放剂(20mM~80mM的氢氧化钠溶液、~、~、~、~***钠、~3%甲酰胺),涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀;然后再加入200μL核酸释放剂,涡旋1min至沉淀完全散开,5000g离心30s,弃上清;向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的血液基因组DNA;取上清液3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。***步骤:50℃,2min,循环1次。第二步骤:95℃,5min,循环1次。第三步骤:95℃15s,55℃30s(收集荧光),循环40次。结果分析:平行扩增的荧光定量PCR反应中,阴性对照无扩增,说明反应体系正常,无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本,然后用人管家基因***DH引物进行荧光PCR扩增检测,结果如图1所示。
植绒棉签iClean植绒棉签是深圳市华晨阳科技有限公司制造,一次性无菌材料,植绒技术**,采用国际***方式包装方式,**的实验室,GMP环境,iso13485管理体系植绒棉签净化无尘植绒棉签:商品名称:CY-96000(植绒棉签);商品包装:100支/盒、50盒/箱、独立包装;棉签尺寸:头宽:5mm,头厚:5mm,头长:22mm;棉杆材质:ABS杆宽:25mm,杆长:132mm,总长:154mm;***方式:紫外线、药(械)准字:深圳市华晨阳科技有限公司生产,请找销售索要资料;有效周期:24个月、一次性使用;***采样拭子:用于流感、猪流感、禽流感、手足口等呼吸道及肠道***的鼻部及咽喉部采样;无尘净化植绒棉签组成:⑴,尼龙植绒拭子(用于采样,释放量高达90%以上)产品特点:①采用国际通用的方便***的纸塑包装。②γ射线***,确保无菌。③大包装盒内的每套独立包装,方便使用。④针对不同的标本类型选用了不同的保存液。(2),无尘采样拭子(细菌、***、支原体、衣原体)采集拭子特点:采集系统采用尼龙植绒拭子,对微生物***害,能很大程度的增加标本的采集及释放量。大量临床实验表明:与普通无菌棉拭子相比,尼龙植绒拭子有着更好的对临床微生物标本的采集与运送效果。这款口腔拭子目前非常多的用于疾病筛查,基因检测,分子诊断,HIV采集细胞,BINGDU 微生物等采集。

同样唾液和口腔拭子中核酸提取方法与血液的提取方法相似包括以下4个过程:1.通过裂解液裂解口腔脱落细胞,释放核酸物质。2.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质,去除其他杂质。3.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。4.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。传统的提取方法由于核酸提取纯化过程耗时长,成本较高,步骤繁多,增加了基因污染的风险。因此需要一种血液、唾液和口腔拭子样本经过简单处理就可以作为模板进行荧光PCR扩增检测方法,满足科研和医学领域快速检测的要求。技术实现要素:本发明提供了一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。该发明通过快速简单处理口腔拭子和血液样本,且无需纯化可直接用于荧光PCR扩增的DNA。10分钟内即可得到应用于ARMS-PCR反应体系的模板DNA。同时优化ARMS-PCR荧光体系,在反应液中加入防污染UDG酶以及提高Taq酶稳定性的的BSA,从而实现血液和口腔拭子基因组快速荧光PCR扩增检测。该方法快速简单,成本低廉,检测灵敏,且用该方法提取的基因组与商品化试剂盒提取的基因组的检测结果相近。口腔拭子为消灭细菌独立包装。四川口腔拭子价格比较
这款口腔拭子是大包装盒的,而且大包装盒内每套独立包装,方便使用。天津口腔拭子信誉保证
中国销售产业凭借独特资源和市场优势,一举成为资本角逐的重点领域之一。从世界范围来看,美、欧、日等发达国家的销售产业发展历史悠久,无论是销售产品制造业还是销售服务业,都处于全球***地位。国外的谷歌、苹果等公司,国内的阿里巴巴、腾讯、万科、保利、平安人寿、万达等企业都根据自身优势扎根大健康领域。抛开生产型的公共服务属性,在市场环境中,企业竞争的秘诀是要创造稀缺,结合消费者高、中、低不同等级的需求,并成为难以替代的产品。医药、保养方面人才培养体制贫乏,经调查,中国的大学中把物流管理与医药知识结合的专业少之又少,单方面精通的人才对于医药冷链物流无法完全胜任,通过调研冷链物流企业,了解到培养物流人员有关冷链物流的相关知识来胜任冷链物流工作的计划进展缓慢,使得人才成为完善医药、保养的重要制约因素。***,完善促进一次性采样拭子,细胞保存液,唾液采集器,一次性使用病毒采样管发展的相关政策,优化产业发展环境。第二,加大对大健康前沿领域支持,技术**健康科技发展。第三,消除体制机制障碍,催生更多一次性采样拭子,细胞保存液,唾液采集器,一次性使用病毒采样管发展模式。第四,大力发展与一次性采样拭子,细胞保存液,唾液采集器,一次性使用病毒采样管相适应的高等教育事业。天津口腔拭子信誉保证
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