Recombinant Mouse CD27/NFRSF7 Protein

通过SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）和Westernblot（西方印迹）可以有效地检测带有His标签的泛素蛋白的纯度和完整性。以下是进行这些检测的步骤：###SDS-PAGE步骤：1.**样品准备**：-将重组泛素蛋白溶解在适当的缓冲液中，通常含有还原剂（如DTT或β-巯基乙醇）以断裂二硫键。-将样品在95-100°C下加热5分钟以变性蛋白质。2.**凝胶准备**：-根据需要的分辨率选择合适的凝胶浓度（例如，12%或15%凝胶用于检测20-100kDa的蛋白质）。3.**上样**：-将变性后的样品加入到凝胶的相应孔中，同时加入分子量标记物作为参照。4.**电泳**：-在恒定电压或恒定电流下进行电泳，直到样品在凝胶中充分分离。5.**染色**：-使用考马斯亮蓝或其他蛋白质染色剂对凝胶进行染色，以可视化蛋白质条带。6.**分析**：-通过比较样品条带与分子量标记物，评估蛋白质的分子量和纯度。###Westernblot步骤：1.**转膜**：-将SDS-PAGE分离的蛋白质从凝胶转移到PVDF或硝酸纤维素膜上。2.**封闭**：-使用封闭液（如5%脱脂奶粉或1%BSA溶液）封闭膜上未被蛋白占据的部分，以减少非特异性结合。3.**一抗孵育**：-使用特异性识别His标签的抗体（一抗）与膜上的蛋白质孵育，通常在4°C过夜。FnCas12a的双链或单链DNA靶标都能激发其反式剪切活性，即在形成三元复合物后，针对非特异序列ssDNA的剪切。Recombinant Mouse CD27/NFRSF7 Protein,mFc Tag

重组Exendin-4是一种基于Exendin-4的重组蛋白，Exendin-4是一种从墨西哥蜥蜴（Gilamonster）的毒液中分离出来的39个氨基酸的多肽。它与胰高的血糖素样肽-1（GLP-1）具有53%的序列同源性，并与相同的膜受体相互作用。重组Exendin-4在体内增强依赖葡萄糖的胰岛素分泌，抑制不适当的高胰高的血糖素分泌，并减慢胃排空。它还在体外和动物模型中促进β细胞增殖和新生。重组Exendin-4是通过大肠杆菌表达的合成DNA序列编码的39个氨基酸的Exendin-4。重组Exendin-4的特点包括：-分子量约为4.2kDa，是一个非糖基化的单一多肽链，包含39个氨基酸。-具有调节血糖水平、减少胰岛素抵抗、降低胰高的血糖素、降低糖化血红蛋白（HbA1c）和刺激β细胞生长以促进胰岛素产生等多种生物活性。-通常以冻干粉的形式提供，需要在无菌条件下用无菌蒸馏水或含有0.1%BSA的水溶液复溶。-纯度高于96%，通过SDS-PAGE和HPLC分析确定。-内毒的素含量低于10EU/mg，通过LAL方法测定。在实验中，可以通过以下方法来优化重组Exendin-4的荧光特性：1.选择合适的激发和发射波长。2.优化激发和发射滤光片。3.评估荧光量子产率。4.调整缓冲液条件，包括pH值和离子强度。5.控制温度和氧浓度。Recombinant Human HPX Protein,His Tag牛痘DNA拓扑异构酶I应储存在-20°C的环境中，这有助于保持其活性。在这种条件下，该酶可以保存长达3年。

确保N末端His标签的泛素蛋白在实验中的活性和稳定性，需要考虑以下几个关键因素：1.**储存条件**：按照生产商的建议，将重组泛素蛋白冻干粉储存在-25~-15℃的条件下，以保持其稳定性和活性。2.**避免反复冻融**：多次冻融会降低蛋白质的稳定性和活性。建议在使用后将剩余的蛋白质分装并储存在推荐的条件下。3.**复溶条件**：按照产品说明，使用无菌蒸馏水或推荐的缓冲液将蛋白质复溶至适当的浓度。通常建议添加0.1%BSA以增加蛋白质的溶解度和稳定性。4.**使用前离心**：在使用前，将蛋白质溶液短暂离心，以确保所有组分都沉积在底部，避免取样时的不均匀性。5.**工作浓度和体积**：根据实验设计，将蛋白质稀释至工作浓度，并尽量使用小体积以减少蛋白质的降解。6.**避免蛋白降解**：在实验过程中，使用蛋白酶抑制剂以防止蛋白降解酶对重组泛素蛋白的降解。7.**避免氧化**：在蛋白质的储存和使用过程中，避免氧化，可以通过添加抗氧化剂如DTT或TCEP。8.**避免污染**：使用无菌技术操作，确保实验器材和环境的清洁，避免微生物污染。9.**操作环境**：在4℃或冰上进行操作，以减少蛋白质降解和非特异性相互作用。

重组人血清白蛋白(rHSA)是一种重要的蛋白质，广泛应用于生物医学领域。植物表达的细胞培养级重组人血清白蛋白(rHSA)具有多项特点和科研应用价值：1.**高纯度和安全性**：植物源重组人血清白蛋白(rHSA)通过基因工程技术在植物如水稻中表达，避免了动物源成分和血源性的病毒污染的风险，提供了一种更安全、更纯净的蛋白质来源。2.**批次稳定性**：与来源于动物的血清白蛋白相比，植物表达的rHSA提供了更高的批次间一致性和稳定性，这对于科研和工业应用中的重复性和可靠性至关重要。3.**多功能性**：rHSA在细胞培养中可以作为重要的添加成分，有助于细胞生长和维持培养环境的稳定性。它还可以作为药物载体，疫苗保护剂、细胞冻存保护剂和医疗器械包埋剂等。4.**生物相容性**：由于rHSA的化学性质与天然HSA非常接近，它在生物医药生产中具有很高的生物相容性，可以用于多种药物的配方和医疗设备。5.**科研应用**：rHSA在科研中可用于细胞培养、药物载体研究、疫苗开发、组织工程和再生医学等领域。6.**生产规模**：植物表达系统具有大规模生产重组蛋白的潜力，这对于满足全球对rHSA日益增长的需求至关重要。Pfu DNA Polymerase的热稳定性和保真性使其在优化PCR条件时更为灵活，比如在GC含量较高的模板中。

PreScissionProtease（PSP）是一种在蛋白质纯化和分析中使用的酶，具有以下特点：1.**特异性识别**：PSP能在低温（4°C）下特异性识别八肽序列Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro或五肽序列Leu-Phe-Gln-Gly-Pro，并在Gln和Gly之间进行酶切。2.**应用**：PSP常用于去除融合蛋白中的GlutathioneS-transferase(GST)、His等标签，有助于纯化目的蛋白。3.**纯度高**：PSP的纯度达到95%以上，确保了实验的准确性和重复性。4.**稳定性好**：PSP在含有50%甘油的储存缓冲液中，-80℃长期储存，有效期2年；小量分装-20℃保存，有效期6个月。5.**酶活定义**：在5℃条件下反应16小时，能够切割100μg的GST标签蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。6.**兼容性强**：PSP的酶切体系中可以兼容1%TritonX-100、Tween-20或NP-40，10mMEDTA和500mMNaCl。7.**注意事项**：某些化合物如100mMZnCl2、4mMAEBSF和100μMChymostatin会抑制PSP的酶活性50%以上。8.**优化酶切效率**：建议进行预实验摸索实验浓度，实际操作中，建议酶用量1:25-1:100U/μg融合蛋白。可以利用现有的计算工具，如CRISPR design tools，预测gRNA的活性和特异性，以辅助实验设计 。Recombinant Human IL-13 Protein

FnCas12a不仅可用于体外dsDNA的特异剪切，也可用于靶标核酸的快速检测，如HOLMES核酸快检技术。Recombinant Mouse CD27/NFRSF7 Protein,mFc Tag

PNGaseF（肽-N-糖苷酶F）是一种普遍使用的酶，它可以从N-连接糖蛋白中去除几乎所有类型的N-连接糖链。其活性和稳定性可能会在不同的pH条件下发生变化。根据NEB（NewEnglandBiolabs）提供的PNGaseF产品信息，PNGaseF的好的活性和稳定性pH为7.5。在pH7.5时，PNGaseF的活性可以达到100%。然而，酶在不同温度下的活性表现也有所不同：在37°C时活性为100%，在30°C时也保持100%，而在23°C时活性下降到65%，17°C时为40%，在3°C时几乎无活性。这表明PNGaseF的活性随温度降低而下降，尽管pH值对酶活性有重要影响，但温度也同样是一个重要因素。此外，PNGaseF的活性会受到SDS的抑制，因此在变性条件下进行酶切时，反应混合物中必须包含NP-40，以1:1的比例存在，以抵消SDS的抑制作用。对于非变性条件下的酶切，可能需要更多的酶和更长的孵育时间。在实验操作中，为了确保PNGaseF的好的活性，建议按照制造商提供的推荐缓冲液和条件进行实验。如果需要在不同的pH条件下使用PNGaseF，可能需要通过实验优化来确定好的条件。