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SpCas9蛋白(来自化脓性链球菌的Cas9蛋白)在基因编辑中的主要作用是作为核酸酶,能够精确地切割目标DNA序列。以下是SpCas9在基因编辑中的几个关键步骤和作用:1.**识别和结合**:SpCas9蛋白与一个单导向RNA(sgRNA)结合,形成RNP复合物。这个复合物能够识别并结合到基因组中与sgRNA互补的特定DNA序列。2.**PAM序列识别**:SpCas9需要一个称为原间隔子相邻基序(PAM)的特定序列作为识别目标DNA的先决条件。对于SpCas9,这个PAM序列通常是5'-NGG-3'。3.**DNA切割**:一旦RNP复合物与目标DNA结合,SpCas9就会在PAM序列的3个碱基对的上游位置切割DNA双链,产生一个双链断裂(DSB)。4.**引发DNA修复**:DNA双链断裂触发细胞的DNA修复机制,包括同源定向修复(HDR)和非同源末端连接(NHEJ)。研究人员可以利用这些修复机制来插入、删除或替换特定的DNA序列。5.**基因修改**:通过HDR,可以在断裂的DNA两端引入特定的DNA模板,从而实现精确的基因编辑。而NHEJ通常会导致小的插入或缺失(indel),这可以用来产生基因的敲除或敲入。6.**提高编辑效率**:为了提高SpCas9的编辑效率,研究人员可能会使用优化的sgRNA设计、蛋白质工程或嵌合融合蛋白等策略。

泛素蛋白是一种在真核细胞中存在的小分子蛋白质,由76个氨基酸残基组成,具有高度的保守性。Recombinant Cynomolgus CCL24 Protein,His Tag

Recombinant Cynomolgus CCL24 Protein,His Tag,标准物质

在生产过程中,确保大肠杆菌表达的重组抑肽酶符合GMP(GoodManufacturingPractice,良好生产规范)标准,需要遵循一系列严格的质量控制和生产规范措施:1.**识别关键物料属性(CMAs)**:确保稳定的物料来源,明确和理解物料对制剂产品研发的影响,包括微生物学安全性和人源特异性的病毒的考量。2.**确定关键工艺参数(CPPs)**:识别和控制影响产品质量的工艺参数,如温度、CO2浓度、pH等,以及生物学范畴的工艺参数,确保产品达到预期的质量属性目标。3.**确立CPP、CMA和CQA之间的关系**:使用DOE(DesignofExperiments,实验设计)方法开展试验设计,确定好的的CMA和CPP组合,以获得满足需求的CQA输出。4.**遵循通用技术文件(CTD)的P.2章节要求**:在药品研发及相关信息中,详细描述物料属性和工艺参数对产品CQA的风险分析和相互关系。5.**生产环境和设备**:生产设备和环境必须符合相关法规要求,遵循NSFISO9001:2015质量体系,并符合GMP指导原则。6.**质量控制**:进行严格的质量控制,包括对产品纯度、活性、蛋白含量等的检测,确保产品符合既定的质量标准。7.储存和运输:按照规定的条件储存和运输产品,确保其稳定性和有效性,一般冻干粉在2-8℃保存,有效期为2年。

Recombinant Cynomolgus CCL24 Protein,His Tag泛素分子可以通过其内部的赖氨酸残基与其他泛素分子形成多聚泛素链,这一步骤通常由E3酶催化。

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酵母重组表达的PNGaseF(N-糖苷酶F)是一种用于蛋白质去糖基化实验的酰胺水解酶,具有以下特点以确保实验中的活性和稳定性:1.**高效性**:具有高比活性,例如750000U/mL,这有助于快速高效地进行去糖基化反应。2.**稳定性**:在含有50%甘油的储存缓冲液中,比较好的活性和稳定性可维持长达24个月。3.**使用条件**:可以在原生或变性条件下使用,对于变性条件下的去糖基化,建议添加NP-40以解除SDS的抑制作用。4.**储存条件**:建议在-15~-25℃保存,有效期1年。5.**酶活定义**:1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。6.**操作简便**:提供了使用说明,包括变性和非变性条件下的蛋白质去糖基化步骤。7.**His标签**:产品带有His标签,便于在实验中进行纯化和检测。8.**纯度**:纯度达到95%以上,通过SDS-PAGE和完整ESI-MS进行确定。9.**快速反应**:有些产品如FastPNGaseF,可以在数分钟内完成彻底且无偏好性地去糖基化。10.**注意事项**:产品供科研使用,操作时应穿戴适当的实验室防护装备。遵循这些指导原则和产品说明,可以确保PNGaseF在实验中的活性和稳定性,从而获得可靠的去糖基化结果。

PreScissionProtease(PSP)在去除融合蛋白标签时,对目的蛋白的纯度和活性的影响通常是积极的,具体表现在以下几个方面:1.**小化污染**:由于PSP具有高度的特异性,它在特定的肽键处切割,从而减少了非特异性切割可能导致的蛋白质片段,这有助于保持目的蛋白的纯度。2.**减少蛋白质修饰**:PSP的特异性切割有助于避免在切割过程中对目的蛋白引入额外的修饰,如磷酸化或糖基化,这些修饰可能会影响蛋白质的活性和稳定性。3.**保持活性**:如果融合蛋白标签的设计和切割位点选择得当,PSP切割后的目的蛋白通常能够保持其原有的生物活性。切割位点通常位于标签和目的蛋白之间,这样切割后不会在目的蛋白上留下额外的氨基酸,从而减少了对蛋白质结构和功能的影响。4.**提高纯度**:PSP切割后,可以通过亲和层析等方法将标签、PSP以及未切割的融合蛋白分离,从而获得高纯度的目的蛋白。5.**便于后续分析**:去除标签后的目的蛋白更易于进行后续的质谱分析、晶体学研究或其他生物化学分析,因为去除了可能干扰分析的标签部分。6.**稳定性**:在某些情况下,融合蛋白的标签可能有助于稳定目的蛋白的构象,因此在去除标签后,需要适当处理以维持目的蛋白的稳定性。FnCas12a系统的脱靶效应较低,这对于减少非目标效应和提高物质的安全性至关重要。

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大肠杆菌表达的重组抑肽酶(Aprotinin)是一种通过基因工程技术在大肠杆菌中生产的蛋白酶抑制剂,具有以下特性和应用:1.**来源**:重组抑肽酶是通过大肠杆菌(E.coli)表达系统生产的,确保了无动物源性成分,减少了病毒污染的风险。2.**结构**:它是一种单体球状蛋白,由58个氨基酸组成,具有三个交联二硫键的单个多肽链。3.**功能**:作为一种竞争性、可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,重组抑肽酶能够抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、激肽释放酶和血纤维蛋白溶酶等的活性。4.**应用**:在生物技术过程中,重组抑肽酶可以替代动物源性抑肽酶,用于重组蛋白生产中抑制丝氨酸蛋白酶的活性,以及在细胞培养等过程中。5.**产品信息**:通常以粉末形式提供,具有明确的货号和规格,如1mg或10mg的包装。6.**产品性质**:包括外观、溶解度、纯度、蛋白含量、酶浓度和活性定义等详细参数。7.**储存条件**:冻干粉在2~8℃保存,有效期为2年。8.**使用方法**:推荐的结合pH>6.0,在pH<3.0的条件下不结合,可直接使用0.9%NaCl溶解,溶解后可-20℃储存。9.**注意事项**:产品作科研用途,操作时需穿着实验服并佩戴一次性手套。UBE2L3在调节NF-κB信号通路中的作用可能对免疫反应和炎症过程至关重要。Recombinant Cynomolgus IL-5 Protein,His Tag

E1在ATP的存在下激发泛素分子,通过一个硫酯键将泛素的C末端甘氨酸残基与E1酶的活性连接起来。Recombinant Cynomolgus CCL24 Protein,His Tag

酵母重组表达的N-糖苷酶F(PNGaseF)是一种酰胺水解酶,具有以下特点:1.**高效性**:PNGaseF是去除几乎所有N-连接寡糖从糖蛋白中有效的酶法方法。它能够在几分钟内快速且无偏倚地释放所有的N-糖链,适合后续的色谱或质谱分析。2.**重组酶**:该酶是重组的酰胺酶,能够从高甘露糖、杂合和复杂寡糖中切割内GlcNAc和天冬氨酸残基之间的连接。3.**纯度**:纯度达到95%以上,通过SDS-PAGE和完整ESI-MS进行确定。4.**储存稳定性**:在含有50%甘油的储存缓冲液中,好的活性和稳定性可维持长达24个月。5.**使用条件**:可以在原生或变性条件下使用,对于变性条件下的去糖基化,建议添加NP-40以解除SDS的抑制作用。6.**比活性**:具有高达100000U/mL的比活性。7.**His标签**:产品带有His标签,常用于抗体及其相关蛋白的完全去糖基化。8.储存条件:-25~-15℃保存,有效期1年。9.**无甘油版本**:还提供了无甘油版本的PNGaseF,这有助于在HPLC和质谱分析中获得结果。10.**酶活定义**:1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。这些特点使得酵母重组表达的PNGaseF成为研究和分析糖蛋白糖链结构的重要工具。Recombinant Cynomolgus CCL24 Protein,His Tag

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RcView吖啶橙核酸染料:一种安全高效的核酸染色选择RcView吖啶橙核酸染料是一种新型的荧光染料,为核酸染色设计,可作为溴化乙锭(EB)的替代品。它具有高灵敏度、低毒性以及操作简便的特点,广应用于琼脂糖凝胶电泳和细胞染色实验中。产品特点高灵敏度:RcView与核酸结合后能产生强烈的荧光信号,其灵敏度与传统的溴化乙锭(EB)相当。安全性高:与EB不同,RcView在多项致突变性试验中均未表现出致疾病性,是一种更安全的替代品。双重荧光特性:RcView与双链DNA结合时发出绿色荧光(激发波长488nm,发射波长515nm),而与单链DNA或RNA结合时发出红色荧光。适用范围广:不仅适用于DNA...

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