Recombinant Biotinylated Human TFPI Protein

牛痘DNA拓扑异构酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）是一种来源于牛痘病毒的I型真核拓扑异构酶，具有以下功能和应用：1.**功能**：-牛痘DNA拓扑异构酶I可以催化双链DNA分子中单链DNA特定序列位置的磷酸二酯键的断开和连接。-具有解超螺旋的酶(DNARelaxingEnzyme)活性，能够通过快速的酶切和连接使双链共价闭合环状的正或负超螺旋DNA发生解超螺旋，形成含有较少的正或负超螺旋的双链环状DNA分子。-能够使双链DNA形成绳结(knotting)或解开绳结(unknotting)，联结互补的单链环状DNA成为双链环状DNA。2.**应用**：-作为一种DNA重组连接的新型工具酶，用于DNA载体和重组片段的连接、缺刻修复、接头连接等。-适用于TOPO克隆载体的制备、NGS建库中的接头连接等。-在TOPO克隆技术中，DNA拓扑异构酶I同时具有限制酶和连接酶特性，其生物学功能是在复制期间切割并重新连接DNA。3.**使用方法**：-用于DNA快速酶切流程，包括配制体系反应液、轻柔混匀、37℃孵育15分钟等步骤。4.**储存条件**：-建议在-25～-15℃保存，有效期为3年。5.**注意事项**：-避免起泡或剧烈搅拌、涡旋等操作，以防止酶失活。牛痘DNA拓扑异构酶I因其独特的功能，在分子生物学研究和基因工程中扮演着重要的角色。Pfu DNA Polymerase与Taq酶的对比：与Taq酶相比，Pfu DNA Polymerase的错误率更低，适合高精度实验。Recombinant Biotinylated Human TFPI Protein,His-Avi Tag

质粒DNA提取后的储存条件对于保持其活性至关重要。以下是一些推荐的储存方法：1.**干燥保存**：质粒DNA以干粉状态保存是比较好的方法。如果总DNA以溶液形式保存，可以使用1×TE缓冲液稀释，且TE缓冲液的pH值应为8.0-8.5之间。2.**低温保存**：植物总DNA低温保存比较好在-80℃以下或液氮保存。如果没有条件，也可以在-20℃保存。总DNA应避免经常冻融，同时建议每份样品保存3-5个样本。总DNA提取后保存的时限通常较组织要长（＞两年），但若长期保存，每隔两年应抽测，对不符合使用要求的DNA进行更新。3.**避免反复冻融**：反复冻融会破坏DNA的完整性和活性，因此应尽量避免。4.**使用保护剂**：化学添加剂如二甲基亚砜(DMSO)可以防止DNA单链断裂，但因其毒性和使用量的问题，并不是理想的保护剂。5.**封装技术**：通过封装技术保存DNA，可以隔绝外界水、氧气和光等可能影响DNA稳定的因素。例如，DNAshell®技术基于密封的不锈钢微型胶囊，在惰性气氛下，给予DNA干粉保护。6.**使用稳定剂**：一些天然的双糖，如海藻糖，被认为是一种多功能的保护剂，可以保护生物体免受冷冻、加热等不利条件的影响。Recombinant Human/Cynomolgus/Rhesus macaque CD28(hFc Tag)E1通常被认为是泛素化过程中的限速步骤，因为它涉及到泛素的激起和ATP的水解。

蛋白A-微球菌核酸酶（pA-MNase）是一种特殊的融合蛋白，它结合了蛋白A和微球菌核酸酶（MNase，MicrococcalNuclease）的特性。以下是pA-MNase的一些关键特点和应用：1.**融合表达产物**：pA-MNase是蛋白A与微球菌核酸酶MNase的融合表达产物，因此它同时具有ProteinA的抗体结合活性和MNase的核酸内切酶活性。2.**双重功能**：由于其双重功能，pA-MNase常用于蛋白质-DNA相互作用研究，特别是在ChIC（ChromatinImmunocleavage）和CUT&RUN（CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease）技术中。3.**ProteinA的特性**：ProteinA是一种发现于金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）的细胞壁表面蛋白，分子量为42kDa，能特异性地与哺乳动物免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）结合，通常结合部位为免疫球蛋白的Fc区。4.**微球菌核酸酶（MNase）的特性**：MNase是一种核酸内切酶，能够降解核酸，常用于降解蛋白质制备中存在的核酸，减少细胞裂解液的粘度，以及用于染色质结构分析和快速RNA测序。5.**反应条件**：MNase的反应条件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer，需要补充100µg/ml重组白蛋白，分子生物学级，并在37°C下孵化。

在DNA提取过程中避免RNA污染的关键在于采取一系列措施来确保RNA被有效去除或降解，同时保护DNA的完整性和纯度。以下是一些确保DNA提取过程中避免RNA污染的策略：1.**使用专门的DNA提取试剂盒**：选择高质量的DNA提取试剂盒，这些试剂盒通常已经包含了防止RNA污染的措施，如特定的裂解液和纯化步骤，能够有效去除RNA。2.**加入RNA酶（RNase）处理**：在DNA提取过程中加入RNase处理步骤，可以有效地去除残留的RNA污染。RNase是一种能够特异性降解RNA的酶，可以在不影响DNA完整性的前提下去除RNA污染。3.**优化实验操作步骤**：在破碎细胞时，选择合适的破碎方法和破碎时间，避免过度破碎导致RNA的释放；在DNA纯化阶段，控制好离心速度和时间，避免RNA的沉淀。4.**使用无RNase的试剂和耗材**：使用经过RNase-free处理的实验器材和试剂，确保实验过程中不会引入外源性RNA污染。5.**严格控制实验环境**：保持实验室台面和工作区域干净无尘，定期对实验室进行消杀，避免RNA酶污染。6.**个人防护和操作规范**：在处理DNA样品时，佩戴无菌手套和口罩，以减少呼吸道和皮肤污染的风险。使用不同的工具处理不同的样品，或者在处理前后彻底清洗工具，避免交叉污染。FnCas12a产品不含DNA内切酶和外切酶，也不含RNA酶，保证了实验的准确性和重复性。

T7EndonucleaseI（T7EI）是一种特殊的DNA内切酶，具有以下特点：1.**识别错配DNA**：T7EI能够识别并切割不完全配对的DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。2.**切割位点**：T7EI切割错配位点5'端的、第二或第三个磷酸二酯键。3.**灵敏度**：T7EI对错配DNA的识别非常灵敏，能够检测并切割单碱基和多碱基的错配。4.**应用**：T7EI常用于CRISPR/Cas9等基因编辑技术导致的基因突变的鉴定。它通过识别错配DNA来帮助鉴定基因编辑是否成功以及是否有非目标效应。5.**直接电泳检测**：T7EI的产物可以直接通过电泳进行检测，这使得它在实验操作中更为方便。6.**来源**：T7EI来源于大肠杆菌菌株，是一种麦芽糖结合蛋白（MBP）和T7核酸内切酶I（T7EI）的融合蛋白。7.**成本效益**：尽管T7EI在商业上使用时成本较高，但它在大规模样本测试中，尤其是在基因突变鉴定方面，提供了一种有效的筛选方法。8.**特殊注意事项**：T7EI能够识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA，但不能识别1bp的插入、缺失或突变。这些特点使得T7EndonucleaseI成为基因突变鉴定中一个非常有用的工具，尤其是在CRISPR/Cas9等基因编辑技术的应用中。将含有重组质粒的表达载体转化到宿主细胞中，通常是大肠杆菌或其他合适的细胞系。Recombinant Human CD2/SRBC(His Tag)

牛痘DNA拓扑异构酶I具有解超螺旋的活性，可以解开双链闭合环状DNA的超螺旋结构，便于后续的酶切反应。Recombinant Biotinylated Human TFPI Protein,His-Avi Tag

pA-MNase（蛋白A-微球菌核酸酶）在以下实验中特别有用：1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**：这是一种用于研究蛋白质-DNA相互作用的技术，pA-MNase在此技术中用于在免疫沉淀后切割染色质DNA，以分析特定蛋白质与DNA的结合位点。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**：这是一种蛋白质-基因组互作研究技术，pA-MNase在此技术中用于在目标蛋白质被抗体识别后，通过核酸酶活性切割附近的DNA，从而释放与目标蛋白质相互作用的DNA片段。CUT&RUN技术相比传统的ChIP-Seq具有实验周期短、信噪比高、可重复性好以及细胞投入量低的优势，尤其适用于早期胚胎发育、干细胞、**以及表观遗传学等研究领域。3.**染色质免疫沉淀实验**：pA-MNase在染色质免疫沉淀实验中用于染色质片段化，它在核小体间DNAlinker上进行切割保持了核小体的完整性，并且由于其温和的酶解条件，消除了超声功率的可变性和超声过程中染色质乳化所带来的负面影响。4.**去除核酸污染**：pA-MNase也可用于去除细胞裂解液中的核酸，以减少样品的粘度，这对于后续的蛋白质分析实验尤为重要。